本文關(guān)鍵詞：血漿miRNA-4787-5P和miRNA-4306對(duì)急性主動(dòng)脈夾層的診斷價(jià)值

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【摘要】：研究背景及目的急性主動(dòng)脈夾層(Acute Aortic Dissection,AAD)是一種死亡率很高的危重心血管急癥。流行病學(xué)調(diào)查顯示,AAD的發(fā)病率大約為每年60人/10萬(wàn)人,且發(fā)病率正在逐年上升。主動(dòng)脈夾層急性期內(nèi)主動(dòng)脈破裂的風(fēng)險(xiǎn)極高,40%的患者立即死亡,此后每小時(shí)有1%的患者死亡。目前,隨著多重螺旋計(jì)算機(jī)斷層掃描(Computed Tomography,CT)、經(jīng)胸及經(jīng)食管超聲心動(dòng)圖、MRA(magnetic resonance angiography)等的應(yīng)用,雖然可以明確的診斷主動(dòng)脈夾層,但這些檢查均不能在床邊進(jìn)行且需要等待和操作過(guò)程,部分主動(dòng)脈夾層患者甚至在明確診斷前已經(jīng)死亡。由于累及血管節(jié)段的不同,臨床表現(xiàn)多變且不典型,病因也較復(fù)雜,臨床上較容易漏診及誤診。影像學(xué)檢查如主動(dòng)脈全程CTA是診斷AD的重要手段,主動(dòng)脈造影是診斷主動(dòng)脈夾層的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但價(jià)格昂貴,操作復(fù)雜,在基層醫(yī)院或急診環(huán)境下有時(shí)難以及時(shí)完成,不利于臨床的早期診斷。因此臨床上迫切需要一種早期篩查且檢測(cè)方法簡(jiǎn)單易行的指標(biāo)。微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一類長(zhǎng)約18-25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA的總稱,被認(rèn)為是基因表達(dá)負(fù)調(diào)控的重要機(jī)制之一。近年來(lái),mi RNA被發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定存在于血漿/清中,被稱為循環(huán)mi RNA。多項(xiàng)研究表明,mi RNA廣泛參與心血管系統(tǒng)的功能調(diào)控,與很多心臟疾病相關(guān),其相關(guān)循環(huán)mi RNA也在這些心血管疾病中檢測(cè)出,并有可能作為診斷心血管疾病的潛在生物標(biāo)記物。已有一些研究探討了AAD患者主動(dòng)脈組織及血漿標(biāo)本和正常對(duì)照組中mi RNA表達(dá)譜的差異,也有研究通過(guò)動(dòng)物模型來(lái)研究AAD動(dòng)脈組織中mi RNA表達(dá)譜的差異。但國(guó)內(nèi)外大部分關(guān)于mi RNAs在AAD中的研究都是基于主動(dòng)脈夾層發(fā)病機(jī)制的探索。本研究的目的是探索mi RNA是否可以作為急性主動(dòng)脈夾層臨床早期診斷的生物標(biāo)志物。研究方法本實(shí)驗(yàn)分為兩組:急性主動(dòng)脈夾層患者組(AD組)和正常志愿者對(duì)照組(C組)。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并簽訂患者知情同意書,分別收集2015年1月~2015年12月入住鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院并確診為急性主動(dòng)脈夾層的各型患者和年齡性別配比相同的正常志愿者(對(duì)照組)的外周血漿,并詳細(xì)記錄入組者的一般情況和基本資料。先從中分別選取3例急性主動(dòng)脈夾層患者術(shù)前外周血漿和3例正常志愿者外周血漿樣本,提取分離總RNA并質(zhì)檢;采用Agilengt mi RNA芯片進(jìn)行mi RNA表達(dá)譜分析,初步篩選出在主動(dòng)脈夾層患者和正常人血漿中差異表達(dá)的mi RNA分子,并選出2個(gè)表達(dá)差異顯著的mi RNAs,進(jìn)行熒光定量RT-PCR(Fluorescence quantitative Reverse Transcription-polymerase Chain Reacto,q RT-PCR)大樣本驗(yàn)證,最后應(yīng)用受試者工作曲線(receiver operating characteristic,ROC)計(jì)算曲線下面積(area under the receiver operating characteristic curve,AUC)等來(lái)分析篩選得到的mi RNA對(duì)AAD早期診斷的敏感性及特異性。結(jié)果采用Agilent Human mi RNA array篩選出兩個(gè)表達(dá)差異顯著的has-mi RNA-4787-5P和has-mi RNA-4306。然后通過(guò)q RT-PCR大樣本定量驗(yàn)證,結(jié)果顯示:急性主動(dòng)脈夾層患者血漿中的has-mi RNA-4787-5P的相對(duì)表達(dá)量明顯高于正常對(duì)照組(0.799±0.888 VS 0.134±0.112,P=0.0000.010.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且與基因芯片檢測(cè)結(jié)果一致;而has-mi RNA-4306在急性主動(dòng)脈夾層患者血漿中的相對(duì)表達(dá)量比正常對(duì)照組血漿中高(0.019±0.049 VS0.006±0.009,P=0.0540.05),但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與基因芯片檢測(cè)結(jié)果不一致。ROC曲線分析顯示has-mi RNA-4787-5P對(duì)AAD的檢測(cè)敏感度為77%,特異度為87%,曲線下面積AUC為0.883(95%CI,0.823-0.944),P=0.0000.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。has-mi RNA-4306對(duì)AAD的檢測(cè)敏感度為66%,特異度為53%,AUC為0.561(95%CI,0.456-0.667),P=0.2600.05,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.has-mi RNA-4787-5P有可能成為急性主動(dòng)脈夾層早期診斷的潛在生物標(biāo)志物。2.has-mi RNA-4306是否能作為急性主動(dòng)脈夾層早期診斷的潛在生物標(biāo)志物還有待進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R543.1

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