本文關(guān)鍵詞：PPARγ激動(dòng)劑對(duì)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量及ABCG1、LXRα表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:通過體外培養(yǎng)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞,誘導(dǎo)分化建立泡沫細(xì)胞模型,然后測(cè)定PPARγ激動(dòng)劑鹽酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride,PG)對(duì)泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量及ABCG1、LXRα表達(dá)的影響,旨在初步探究PG對(duì)泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的調(diào)控機(jī)制。方法:1.體外培養(yǎng)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞,再用50mg/L ox-LDL孵育48h,最后以油紅O染色并在光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及變化。2.以不同濃度的PG(對(duì)照組0μmol/L、實(shí)驗(yàn)組5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用泡沫細(xì)胞24h后,酶比色法測(cè)定泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯(Cholesterol Ester,CE)的含量;以30μmol/L的PG作用泡沫細(xì)胞不同時(shí)間(對(duì)照組Oh、實(shí)驗(yàn)組6h、12h、24h、48h)后,酶比色法測(cè)定泡沫細(xì)胞內(nèi)CE的含量。3.將誘導(dǎo)分化好的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞,給予不同濃度的PG(對(duì)照組0μmol/L、實(shí)驗(yàn)組5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用24h后,RT-PCR和Western blot分別測(cè)定ABCG1、LXRα的基因及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:(1)體外培養(yǎng)的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞半貼壁生長,主要呈類圓形和不規(guī)則多邊形,細(xì)胞體積較小,含1-2個(gè)核,有偽足伸出,經(jīng)50mg/L ox-LDL孵育48h后,細(xì)胞體積顯著變大,油紅O染色胞質(zhì)內(nèi)可見大量紅染脂滴。(2)與對(duì)照組相比,不同濃度的PG干預(yù)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞24h后,細(xì)胞內(nèi)的CE含量均顯著減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與對(duì)照組相比,30μmol/LPG作用RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞0h、6h、12h、24h、48h后,細(xì)胞內(nèi)的CE含量均顯著減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(3)與對(duì)照組相比,不同濃度PG組巨噬細(xì)胞ABCG1、LXRα的m RNA及蛋白的水平呈濃度依賴性增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1.PPARγ激動(dòng)劑可減少RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量,并呈濃度和時(shí)間依賴性。2.PPARγ激動(dòng)劑可呈濃度依賴性增加小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞內(nèi)ABCG1、LXRα的m RNA及蛋白表達(dá)。3.PPARγ激動(dòng)劑減少泡沫細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯的含量可能是通過上調(diào)ABCG1、LXRα的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的,此機(jī)制介導(dǎo)的膽固醇流出將成為改善AS的主要途徑之一。
【關(guān)鍵詞】：吡格列酮 過氧化物酶受體γ激動(dòng)劑 泡沫細(xì)胞 膽固醇含量 肝X受體α 三磷酸腺苷轉(zhuǎn)運(yùn)體G1
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R543
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對(duì)照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料和方法12-21
• 1.1 材料和儀器12-13
• 1.2 方法13-21
• 2 結(jié)果21-27
• 2.1 泡沫細(xì)胞模型的建立21
• 2.2 鹽酸吡格列酮對(duì)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇含量的影響21-23
• 2.3 鹽酸吡格列酮對(duì)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞ABCG1、LXRΑMRNA的表達(dá)23-24
• 2.4 鹽酸吡格列酮對(duì)巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞 ABCG1 LXRα 蛋白的表達(dá)24-27
• 3 討論27-29
• 4 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 綜述33-41
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 致謝41-42
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果42-43
• 個(gè)人簡介43

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本文編號(hào)：1086100