目的: 研究RNAi沉默COX-2對HSC-T6細(xì)胞趨化因子表達(dá)的影響。 方法: 1、將實驗分為三組：空白對照組、HK空質(zhì)粒組、COX-2shRNA1實驗組。 2、北京博奧生物有限公司的27K Rat Genome Array芯片掃描觀察HK質(zhì)粒對照組、COX-2shRNA1轉(zhuǎn)染組不同時間段中HSC-T6細(xì)胞趨化相關(guān)因子的差異表達(dá)情況； 3、Trizol法提取HSC中的總RNA，采用RT-PCR方法分步驗證基因芯片所顯示的相關(guān)基因差異表達(dá)結(jié)果。 結(jié)果： 1、熒光顯微鏡觀察顯示COX-2shRNA1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞株不同時間段，轉(zhuǎn)染效率均在70%以上； 2、按Ratio值≥1.5和≤0.667標(biāo)準(zhǔn),沉默COX-248小時后，基因芯片掃描顯示HSC-T6細(xì)胞中CXCL11、CX3CL1、CXCL10、CCL2表達(dá)均增加； 3、按Ratio值≥1.5和≤0.667標(biāo)準(zhǔn),沉默COX-272小時后，基因芯片掃描顯示HSC-T6細(xì)胞中CX3CL1、CXCL10表達(dá)增加； 4、RT-PCR驗證COX-2shRNA1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞72小時后結(jié)果，證實CX3CL1mRNA表達(dá)增...

【文章頁數(shù)】：32 頁

【學(xué)位級別】：碩士

本文編號：3880661