目的:利用低速離心和差速貼壁的特性,探討一種高效的BALB/c小鼠原代Kupffer細胞(Kupffer cells,KC)分離純化方法,為進一步研究KC在肝臟疾病中的作用奠定良好的基礎。方法:0.1%IV型膠原蛋白酶分階段(原位灌注和水浴振蕩)消化肝臟組織形成單細胞懸液,低速離心肝臟單細胞懸液初步分離KC,結合差速貼壁培養(yǎng)進一步純化KC;本方法與傳統(tǒng)的密度梯度法比較分離的KC數量和細胞活性;應用F4/80免疫熒光染色鑒定本法提取細胞的形態(tài)學特征、流式細胞術檢測提取細胞分子標志物(F4/80)的表達、墨汁吞噬實驗進行KC吞噬功能鑒定;構建KC缺氧/復氧模型,流式細胞術檢測主要組織相容性復合體(MHC)Ⅱ、CD40、CD68和CD86的表達,ELISA檢測腫瘤壞死因子α(TNF-α)的表達。結果:單只BALB/c小鼠用傳統(tǒng)的Percoll密度梯度法可獲得(2.19±0.43)×106個KC,細胞存活率(90.2±3.7)%。單只BALB/c小鼠肝臟用本法可獲得(5.83±0.54)×106個KC,細胞存活率達(92.3±2.7)%,在提取數量上本法顯著優(yōu)于傳統(tǒng)的Percoll密度梯度法;...

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【學位級別】：碩士

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英漢縮略語名詞對照
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英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結果
3 討論
全文總結
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3798313