肝纖維化（hepatic fibrosis,HF）是一組非常常見的慢性肝疾病的病理學綜合征。在整個肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中，肝細胞內會發(fā)現(xiàn)許多基因的發(fā)生異常表達，并增加發(fā)展為肝細胞性癌的危險性。在肝纖維化的發(fā)生過程中，肝星狀細胞（hepatic stellate cells, HSCs）的活化增殖是其中的一個重要環(huán)節(jié)。肝星狀細胞位于竇周Disse間隙內，在正常狀態(tài)下，HSC主要儲存和代謝維生素A，合成與分泌少量的細胞外基質（extracellular matrix,ECM）。當HSC受刺激過度激活時，轉變成具有增生活性的、產生纖維的具收縮特性的肌成纖維細胞并表達α平滑肌肌動蛋白（Alpha smooth muscle actin，α-SMA）合成異常增多的ECM超過肝清除能力導致其在肝內聚集是肝纖維化形成的重要機制。有研究表明適當濃度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可刺激HSC，使其提高增殖率和表達細胞內膠原增強。LPS誘導的細胞模型能夠較好地模擬出肝纖維化形成過程中HSC在數(shù)量和功能方面的主要改變，為HSC活化的研究提供了一個較為全面的細胞模型。 小泛素相關修...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 不同濃度 LPS 刺激 HSC-T6 SUMO-1 的表達水平變化
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗細胞
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.0 器材的滅菌和去 RNA 酶
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 相關液體的配制
        2.2.3 實驗分組及細胞處理
        2.2.4 real-time PCR 檢測 SUMO-1 mRNA 表達
        2.2.5 Western blot 檢測各組織蛋白的表達
        2.2.6 統(tǒng)計學處理
    2.3 結果
        2.3.1 Real time-PCR 結果
        2.3.2 Western blot 檢測結果
    2.4 討論
第3章 SUMO-1 表達變化后對 HSC-T6 增殖的影響及其機制研究
    3.1 實驗材料
        3.1.1 細胞株
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 器材的滅菌和去 RNA 酶
        3.2.2 細胞培養(yǎng)
        3.2.3 慢病毒載體的構建
        3.2.4 慢病毒轉染 HSC-T619
        3.2.5 利用定量 PCR 檢測轉染沉默、過表達 SUMO-1 以及各對照組慢病毒后的 SUMO-1 表達水平
        3.2.6 利用 Western blot 實驗檢測各組蛋白的表達水平
        3.2.7 利用流式細胞儀檢測細胞周期及細胞凋亡
        3.2.8 統(tǒng)計學處理
    3.3 結果
        3.3.1 熒光定量 PCR 結果分析
        3.3.2 Western blot 結果分析
        3.3.3 流式細胞儀檢測結果
        3.3.4 小結
        3.3.5 在干擾 SUMO-1 表達水平的情況下 SUMO-2 及 SUMO-3 的變化
    3.4 討論
第4章 結論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3785459