發(fā)布時間：2023-02-08 20:08

　　目的:探討CYP2E1在脂肪酸酒精協同刺激下對炎性因子表達及信號通路的影響及意義.方法:1、慢病毒轉染構建CYP2E1穩(wěn)定高表達的巨噬細胞系(Raw264.7細胞),此細胞系記為RE1組,用未轉染的普通巨噬細胞系作為參照,記為Raw組。2、使用脂肪酸及乙醇刺激細胞,建立酒精脂肪酸協同增效的炎性模型;同時在這兩個細胞系中分別設立四個組:(1)空白對照組(C組)(2)酒精組(50mM,A組)(3)脂肪酸組(0.5mM,F組)(4)酒精+脂肪酸組(濃度同前,AF組)。3、使用油紅O染色檢測細胞經酒精及脂肪酸刺激后的脂肪變情況;4、使用Real-time PCR檢測細胞中TNF-α的表達;5、使用western blot檢測細胞中NF-κB、MAPK、STAT3的磷酸化蛋白來明確炎性相關的信號通路的表達;6、將模型中各組的上清與正常肝細胞進行共培養(yǎng)4小時后,檢測上清中的轉氨酶變化,用油紅O染色鑒定肝細胞中的中性脂滴累積情況。結果:利用慢病毒技術建立穩(wěn)定高表達CYP2E1的raw細胞系。經Real-time PCR和western blot證實過表達組較對照組CYP2E1mrna水平升高46倍(...

【文章頁數】：56 頁

【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
前言
材料與方法
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結論
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綜述：非酒精性脂肪性肝病相關信號通路的研究進展
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