研究目的: 通過不同基因型的幽門螺桿菌（Helicobacter Pylori,H.pylori）培養(yǎng)上清作用人胃黏膜上皮細胞（GES-1）,研究細胞形態(tài)、凋亡和增殖及P21WAF1、Bax、PTEN、PI3K、p-Akt表達的變化,從而在體外探討H. pylori對胃黏膜上皮細胞的影響及其機制,為H.pylori相關疾病的分子治療提供新的靶點和方向。 研究方法: 根據預實驗結果,分組如下:（1）不同濃度NCTC11637 H.pylori上清液的實驗組,濃度分別為A組（1.3875mg/ml）,B組（2.775mg/ml）,C組（5.55mg/ml）;（2）不同濃度NCTC11639H.pylori上清液的實驗組,濃度分別為A（1.875mg/ml）,B（3.75mg/ml）,C（7.5mg/ml）;（3）陰性對照組（H.pylori培養(yǎng)液）。各組作用GES-1細胞時間均為24h、48h、72h,用倒置顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細胞形態(tài);用四唑藍（MTT）比色試驗檢測細胞生長的抑制率;用RT-PCR檢測mRNA的表達;用免疫細胞化學檢測蛋白的表達。 ... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞株和菌株
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 GES-1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 H.pylori 培養(yǎng)及 H.pylori 培養(yǎng)上清液的制備
        2.2.3 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液作用 GES-1 細胞
        2.2.4 MTT 法檢測細胞生長的抑制率
        2.2.5 透射電鏡觀察細胞的形態(tài)
        2.2.6 RT-PCR 檢測 PTEN、Bax、P21~(WAF1)m RNA
        2.2.7 免疫細胞化學檢測 PTEN、PI3K、p-AKT、Bax 蛋白(PV-9000 二步法 免疫組化檢測試劑)
        2.2.8 統(tǒng)計學處理
第3章 結果
    3.1 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對 GES-1 細胞形態(tài)的影響
    3.2 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對 GES-1 細胞增殖的影響
    3.3 不同基因型H.pylori 培養(yǎng)上清液對PTEN、Bax 及P21~(WAF1)mRNA 表達的影響
    3.4 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對 PTEN、PI3K、磷酸化 Akt、 Bax 蛋白表達的影響
第4章 討論
    4.1 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對 GES-1 細胞增殖及凋亡的影響
    4.2 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對 GES-1 細胞內 P21~(WAF1) 的影響
    4.3 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清對 GES-1 細胞內 Bax 的影響
    4.4 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清對 GES-1 細胞內 PI3K/Akt 信號通 路的影響
第5章 結論
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間的研究成果


【參考文獻】：
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本文編號：3717960