目的:拉米夫定是抗病毒核苷類藥物,對(duì)乙型肝炎病毒（HBV）有明顯的抑制作用,但拉米夫定易復(fù)發(fā)和血清轉(zhuǎn)換率低。因此拉米夫定治療乙型肝炎的最大問(wèn)題是長(zhǎng)期治療后產(chǎn)生病毒變異而耐藥和停藥后HBV DNA的反跳。本研究探討拉米夫定治療后乙型肝炎病毒耐藥位點(diǎn)出現(xiàn)的變化規(guī)律,分析其發(fā)生機(jī)制,對(duì)進(jìn)一步治療方案的確定、分析YMDD變異對(duì)治療效果的影響具有重要臨床價(jià)值。方法:選擇應(yīng)用拉米夫定治療的患者14例,常規(guī)離心后收集外周血清,定量PCR擴(kuò)增,純化后通過(guò)雙脫氧測(cè)序的方法獲得HBV DNA序列,最后通過(guò)計(jì)算機(jī)Mclone軟件進(jìn)行分析,動(dòng)態(tài)觀測(cè)不同耐藥時(shí)段HBV DNA變異位點(diǎn)發(fā)生規(guī)律。結(jié)果:應(yīng)用拉米夫定的患者隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng),HBV DNA水平逐漸轉(zhuǎn)陽(yáng),經(jīng)過(guò)測(cè)序發(fā)現(xiàn)大部分的患者都出現(xiàn)YMDD變異,其中有11例為YVDD變異,而3例出現(xiàn)YIDD變異。隨著用藥時(shí)間的進(jìn)一步延長(zhǎng),部分患者出現(xiàn)ALT反彈,進(jìn)行第2次測(cè)序中發(fā)現(xiàn),在原有YMDD變異基礎(chǔ)之上,又出現(xiàn)許多新的變異位點(diǎn),主要發(fā)生位點(diǎn)有:A181V T184S,A181T S202I,A181T S202I,A181T V214,T184S V214A,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

拉米吠陡治療中HBVDNA陽(yáng)性患者p基因

1.PCR擴(kuò)增結(jié)果拉米夫定治療后 HBVDNA陽(yáng)性患者間隔6個(gè)月P基因的擴(kuò)增，所獲得的陽(yáng)性標(biāo)本共14個(gè)(圖l)，同時(shí)進(jìn)行6個(gè)月后的樣本進(jìn)行第2次PCR擴(kuò)增(圖2)，片段大小為932bp，擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)5%的瓊脂糖電泳，40v電泳40min后，紫外燈下照相。

T1845VZ14A， A181VT1845，T1845’52021， A181VQ2155， A18lVT1845，VZ14AA181T， A1815V214A， SZOZT5239CC3045等變異株的發(fā)生，變異位點(diǎn)集中于181位點(diǎn)，214位點(diǎn)等，見圖1。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]拉米夫定治療中乙型肝炎病毒YMDD野毒株和變異株的變化[J]. 劉傳苗,張欣欣,陸志檬.  肝臟. 2004(02)
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[3]慢性乙型肝炎患者治療前YMDD變異基因的檢測(cè)及分析[J]. 葉曉光,王若倫,郭海波.  中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2002(04)



本文編號(hào)：3540053