目的： 了解胎肝干細(xì)胞在體內(nèi)外是否具有向神經(jīng)組織細(xì)胞分化的潛能，即可塑性，以進(jìn)一步探索其分化規(guī)律；建立胎肝來(lái)源的細(xì)胞在體外向神經(jīng)組織細(xì)胞分化模型。 擬從下面三個(gè)方面研究：小鼠胎肝Sca-1⁺細(xì)胞在體內(nèi)向神經(jīng)組織細(xì)胞分化研究；體外誘導(dǎo)小鼠胎肝Sca-1⁺細(xì)胞向神經(jīng)組織細(xì)胞分化研究；體外誘導(dǎo)人胎肝CD34⁺細(xì)胞向神經(jīng)組織細(xì)胞分化研究。 材料方法： 1．觀察小鼠胎肝Sca-1⁺細(xì)胞移植后在受體鼠腦組織中的分化情況 利用快速的PCR擴(kuò)增小鼠Y染色體特異的性別決定區(qū)蛋白基因（sex determing region protein,Sry）方法鑒定孕14.5d C57BL／6J胎鼠性別（總時(shí)間小于3.5h），免疫磁珠法分離雄性胎鼠肝的Sca-1⁺細(xì)胞，尾靜脈注射Sca-1⁺細(xì)胞（2.0×10³個(gè)／小鼠）到致死劑量（10.0Gy）放射線照射的8-10周C57BL／6J雌性小鼠（輻射后4h內(nèi)注射），然后將實(shí)驗(yàn)小鼠飼養(yǎng)在... 

【文章來(lái)源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

小鼠胚胎性別的鑒定A.M為DNA標(biāo)準(zhǔn)分子量，1OObpladderDNAmarkers，1為空白對(duì)照(無(wú)DNA模

0dsd10d15d20d60d120dtimeaftertransplantation(day)andmale口ale圖2.胎肝Sca一1十細(xì)胞向造血細(xì)胞分化0d為雌性對(duì)照外周血DNA，大小與預(yù)計(jì)擴(kuò)增工L一3基因片段一致(649bP)，無(wú)sry基因擴(kuò)增。male照外周血DNA，產(chǎn)物DNA為2條帶，大小與預(yù)計(jì)擴(kuò)增Sry和工L一3基因(444bp、649bp)，sd、10d、15d、20d、60d、120d分別為移植雄性Sea一1‘10、15、20、60、120天后受體雌鼠外周血DNA擴(kuò)增產(chǎn)物，Sry基因產(chǎn)物致的延長(zhǎng)時(shí)間而增加，說(shuō)明雄性胚胎供體來(lái)源的細(xì)胞在增加。FigureZ，DifferentiationoffetalliverSea一l十eellsintohematopoietiQuantitativeresultsofeleetrophoresis一bandsfromsrygeneProduetsofPgel一imagesystem.‘od’15PCRProductofbloodDNAfromadultfemalemoubandthesize15eonsisteniwithexPectedIL一3gene(649bp).‘Male’15PCRProbloodDNAfromadultmalemouse，twobandstheirsizesareeonsistentwithesrygene(444bp)andIL一3gene(649bp).‘sd，，‘IOd，，‘15d，‘6Od’，and‘120d’arePCRProduetsofbloodDNAfromadultfemalemo10，15，20，60，12od叮5aftertransplantedwithmaleSca一1十cells，respeetiveheightofbarsinereasedwithtimelengthened，andreaehednormallevelofadultwomonths，indieatingthatmalefetalliver-derivedcellsareincreasinhematoPoietiereconstitution.

ficat‘on’oxZo)}B(magn，ficat‘on‘oXZo)圖4.免疫組化和FISH檢測(cè)胚胎肝來(lái)源細(xì)胞在受體小鼠腦組織內(nèi)分化:小鼠Y染色體FISH顯示雌性受體小鼠腦組織中存在特異cy3紅色熒光雜交信號(hào)(A，B)，說(shuō)明有供體來(lái)源的細(xì)胞:NetlN免疫組化顯示部分供體來(lái)源的細(xì)胞NeuN陽(yáng)性(A，實(shí)箭頭所示)(因?yàn)镹euN特異表達(dá)于神經(jīng)元核內(nèi)，所以沒(méi)有用DAPI染色細(xì)胞核);GFAP免疫組化顯示部分供體來(lái)源的細(xì)胞GEAP陽(yáng)性(B，實(shí)箭頭所示)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]神經(jīng)干細(xì)胞研究進(jìn)展[J]. 劉泉開(kāi).  現(xiàn)代診斷與治療. 2000(05)



本文編號(hào)：3417187