本文關(guān)鍵詞：菌群紊亂導(dǎo)致的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在炎癥性腸病腸壁纖維化中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：炎癥性腸病(IBD)主要是指一組以腸道炎癥為特征的慢性腸道疾病。臨床上主要分為克羅恩病(CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(UC)兩種。隨著腸道炎癥的反復(fù)、持續(xù)發(fā)作,腸道慢性損傷的逐漸加重,腸道也會逐漸發(fā)生重構(gòu),最終由腸道炎癥形成腸道纖維化。不僅喪失了基本功能,而且容易出現(xiàn)各種臨床伴隨疾病。腸壁纖維化所致的腸腔狹窄是炎癥性腸病病變不可逆和手術(shù)治療的首位病因。有證據(jù)表明,持續(xù)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)與纖維化相關(guān),是纖維化的可能機制之一。而且ERS在肺、腎、肝等組織纖維化中都有重要作用。同時很多研究表明在IBD腸道纖維化過程中,存在著明顯的菌群紊亂,這種菌群紊亂可以導(dǎo)致持續(xù)ERS的增加。因此,我們想探究是否是菌群紊亂帶來的ERS導(dǎo)致了IBD腸纖維化,且在這個過程中我們通過改善菌群紊亂是否可以改善腸道纖維化過程。為此,我們分別設(shè)計了以下三部分實驗,分別探究在臨床UC患者的結(jié)腸標本中,明顯狹窄處ERS的表達；在TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化小鼠模型中,調(diào)節(jié)ERS是否可以改變纖維化；以及在TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化小鼠模型中,調(diào)節(jié)菌群,是否可以改善ERS的表達和腸道纖維化過程。具體三部分如下：第一部分研究臨床潰瘍性結(jié)腸炎非活動期患者結(jié)腸狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達目的：研究在臨床UC非活動期患者結(jié)腸標本中,狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達,探討在ERS在UC結(jié)腸狹窄中的作用。方法：選用臨床UC非活動期結(jié)腸標本,分別選取其狹窄處與非狹窄處,并與結(jié)腸癌患者正常結(jié)腸標本進行對比。通過HE染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)染色及Western blot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標記、纖維化標記及ERS相關(guān)蛋白的表達情況。探究ERS在UC患者結(jié)腸狹窄處的作用。結(jié)果：實驗發(fā)現(xiàn)相比結(jié)腸癌患者結(jié)腸癌患者正常結(jié)腸標本,UC非狹窄處結(jié)腸,黏膜僅輕度增厚,黏膜結(jié)構(gòu)基本正常,ERS表達輕度增高。而UC狹窄處結(jié)腸組織黏膜紊亂嚴重,黏膜增厚明顯,尤其是黏膜下層更為顯著,膠原外沉積更多,纖維化明顯,且ERS表達明顯增高。結(jié)論：UC患者結(jié)腸狹窄處纖維化明顯增強,ERS是UC患者結(jié)腸纖維性狹窄的重要機制。第二部分在TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型中調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對腸壁纖維化的影響目的：建立TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型,并在此模型基礎(chǔ)上探究調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對腸壁纖維化的影響。方法：在這部分動物實驗中,我們采用了TNBS灌腸來建立IBD慢性腸炎腸纖維化模型。并觀察在加入了ERS保護劑熊去氧膽酸(TUDCA)后對結(jié)腸纖維化及ERS的影響。分別通過HE染色、Masson三色染色、免疫組織化學(xué)染色及Western blot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標記、纖維化標記及ERS相關(guān)蛋白的表達情況。驗證ERS在TNBS導(dǎo)致的腸纖維化模型中的作用。結(jié)果：實驗發(fā)現(xiàn)相比對照組,單純TNBS造模組小鼠結(jié)腸黏膜明顯增高,尤其以黏膜下層最為顯著；膠原沉積明顯增多,以Ⅲ型膠原為主；上皮表達減弱,纖維化標記明顯；且ERS相關(guān)蛋白表達明顯增加。而在加入ERS保護劑TUDCA后,相比單純造模組,小鼠結(jié)腸黏膜變薄,膠原沉積減少,上皮標記升高,纖維化標記變?nèi)?且ERS相關(guān)蛋白也明顯減弱。結(jié)論：在TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型中,ERS保護劑TUDCA可以減弱TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化,ERS是TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化的重要機制。第三部分在TNBS導(dǎo)致的IBD腸纖維化模型中,改善腸道菌群紊亂,對腸道纖維化的影響,且ERS在其中的作用目的：在TNBS誘導(dǎo)的IBD慢性腸炎腸纖維化模型中,通過改善腸道菌群紊亂,觀察對ERS及腸道纖維化的影響。方法：在這部分試驗中,我們在TNBS誘導(dǎo)的IBD腸纖維化模型基礎(chǔ)上,通過飲水中加入果膠和丁酸鈉來調(diào)節(jié)菌群,觀察他們對腸道纖維化和ERS的影響。分別通過HE染色、Masson三色染色、免疫組織化學(xué)染色及Westernblot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標記、纖維化標記及ERS相關(guān)蛋白的表達情況。并通過小鼠糞便進行菌群分析來驗證各組腸道菌群的變化情況。結(jié)果：實驗發(fā)現(xiàn),相比對照組,單純TNBS造模組小鼠結(jié)腸黏膜明顯增高,尤其以黏膜下層最為顯著；膠原沉積明顯增多,以Ⅲ型膠原為主；上皮表達減弱,纖維化標記明顯；且ERS相關(guān)蛋白表達明顯增加。而在加入了果膠和丁酸鈉后,相比單純造模組,小鼠結(jié)腸黏膜變薄,膠原沉積減少,上皮標記升高,纖維化標記變?nèi)?且ERS相關(guān)蛋白也明顯減弱。而且通過腸道菌群分析證實了在單純TNBS造模組腸道菌群明顯紊亂,菌群多態(tài)性減弱,條件致病菌明顯增多。而在加入果膠和丁酸鈉后,腸道菌群紊亂改善,菌群多態(tài)性增加,條件致病菌減少。結(jié)論：在TNBS導(dǎo)致IBD腸纖維化模型中,果膠和丁酸鈉可以減輕TNBS誘導(dǎo)的菌群紊亂,且可以進一步減弱ERS的表達,減輕腸纖維化。結(jié)合前兩部分研究進一步驗證在IBD中,腸道菌群紊亂導(dǎo)致持續(xù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,是IBD腸道纖維化的機制之一。且改善腸道菌群紊亂,可以有效減輕腸道的持續(xù)ERS,從而減輕腸道纖維化過程。
【關(guān)鍵詞】：腸道菌群 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 炎癥性腸病 腸纖維化
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R574.62
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 縮略詞表12-13
• 第一章 緒論13-16
• 第二章 臨床潰瘍性結(jié)腸炎非活動期患者結(jié)腸狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達16-31
• 一、前言16
• 二、材料與方法16-26
• 1、實驗儀器及實驗試劑16-18
• 2、實驗分組、處理及取材方法18-19
• 3、組織病理學(xué)檢測19-22
• 4、蛋白免疫印跡法Western blot22-26
• 三、實驗結(jié)果26-29
• 1、UC患者結(jié)腸狹窄處纖維化明顯X椙
  
  本文編號：339800
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