目的:探討腸道超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道（HCN）中HCN2亞型在腸易激綜合征（IBS）大鼠腸道高敏感及腸道動力異常中的作用,從而進一步揭示IBS發(fā)病機理,為IBS的治療提供新的靶點。方法:（1）IBS模型大鼠自出生后第8d起,每天下午同一時間接受一次結直腸刺激（colorectal irritation,CI）,持續(xù)一周;正常對照組大鼠除了不行結直腸刺激外,其他過程與IBS模型組一樣。大鼠在出生后第8周,通過檢測腹外斜肌對結直腸擴張的反應來評估大鼠是否出現內臟痛覺敏化;并通過腹部觸診與肉眼觀察肛門口的清潔度,剔除便秘與明顯腹瀉的大鼠進入實驗。（2）采用Western bolt方法檢測HCN2在IBS模型鼠腸道的表達。（3）腹腔注射給予0.1ml濃度為5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L的HCN2阻斷劑（尼氟酸）,觀察不同濃度的尼氟酸（Niflumic acid）對IBS模型組大鼠和正常對照組大鼠腹外斜肌放電的變化。（4）IBS模型大鼠鞘內給予藥物ZD7288（HCN非選擇性抑制劑）阻斷HCN通道,30min后再腹腔注射50μmol/L尼氟酸,觀察其對腹外斜肌放電的... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

新生期結直腸擴張刺激導致成年大鼠出現內臟敏感性增強A&B：正常大鼠和IBS大鼠在40和60mmHg結直腸擴張壓力下腹肌放電原始圖；C:大

CRD (n=8). *: p＜0.052 HCN2 在 IBS 大鼠直腸和回腸的表達水平高于正常大鼠腹外斜肌放電結果顯示 IBS 大鼠的內臟痛較正常組明顯增強，而我們欲研究腸道 HCN2 通道與內臟痛的關系。那么 IBS 大鼠與正常對照組大鼠腸道 HCN2 的表達情況是否有所不同呢？我們根據Western blot曝光結果采用Image J圖像處理軟件分析條帶的光密度值對蛋白條帶進行定量分析，（HCN2 光密度值的相對比=HCN2 光密度值/actin 光密度值）。數據顯示：正常大鼠結直腸（colorectum）HCN2 光密度值的相對比值為 0.69±0.15（n=3）；IBS 大鼠結直腸（colorectum）HCN2 光密度值的相對比值為 1.09±0.04（n=3）；正常大鼠回腸（ileum）HCN2光密度值的相對比值為 0.49±0.07（n=3）；IBS 大鼠回腸（ileum）HCN2 光密度值的相對比值為 1.15±0.20（n=3）；IBS 大鼠結直腸和回腸 HCN2 的表達量分別高于正常大鼠，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05，見圖 2、圖 3）。

圖 3 大鼠回腸 HCN2 表達A：對照組和 IBS 組大鼠回腸 HCN2 蛋白表達水平的原始圖；B：對照組和 IBS 組大鼠回腸 HCN2 蛋白表達水平的統(tǒng)計圖（n=3）。*: p＜0.05Figure 3 The expression of ileum HCN2 in ratsA: The original diagrams of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBSrats; B: The statistical chart of the expression level of ileum HCN2 protein in normal and IBS rats(n=3). *: p＜0.053 HCN2 抑制劑尼氟酸可降低 IBS 大鼠的痛覺敏感性為了研究 HCN 通道對內臟痛的影響，腹腔給予 HCN 通道抑制劑，觀察 IBS大鼠和正常對照組大鼠內臟痛的變化。用 DMSO 溶解 HCN2 抑制劑（尼氟酸/Niflumic acid）至濃度分別為 5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L，腹腔注射不同濃度的尼氟酸，觀察正常對照組大鼠和 IBS 模型組大鼠腹外斜肌放電的變化情況，統(tǒng)計結果顯示：四組正常對照組大鼠（每組 n=6）分別腹腔注射 DMSO、尼氟酸

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3281628