核激素受體（Nuclear20hormone20receptors,20NHRs）是一類配體依賴性的轉(zhuǎn)錄因子,參與體內(nèi)眾多的生理過程。他們能與小分子配體結合而調(diào)節(jié)其靶基因表達。法尼酯衍生物X受體（Farnesoid20X20Receptor,20FXR）是核激素受體超家族成員之一。FXR具有典型的NHR家族結構。目前的研究發(fā)現(xiàn)FXR在調(diào)控膽汁酸、脂蛋白和葡萄糖代謝、肝再生、腸道細菌生長以及肝毒素應答反應等過程中扮演重要作用。FXR被視為體內(nèi)膽汁酸感應器,通過調(diào)節(jié)膽汁酸合成限速酶cholesterol20720alpha-hydroxylase20（CYP7A1）活性而調(diào)控體內(nèi)膽汁酸的穩(wěn)態(tài)。在肝臟中,膽固醇被代謝形成膽汁酸。最近的研究發(fā)現(xiàn)膽汁酸不僅可以作為生理溶劑以有利于脂溶性維生素和脂肪的吸收、轉(zhuǎn)運和分布,還可以作為信號分子以激活核受體并調(diào)節(jié)膽汁酸和膽固醇代謝。膽汁酸也具有細胞毒性,當膽汁酸在體內(nèi)超過正常水平時,從而引起肝損傷,引起膽汁淤積,甚至肝癌。三萜類化合物廣泛存在于植物界、中草藥以及人們的飲食中。到目前,人們已發(fā)現(xiàn)超過4000種不同三萜類化合物。甘草次酸（Glycyrrheti... 

【文章來源】：中國科學技術大學安徽省 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 核激素受體
        1.1.1 核激素受體分類
        1.1.2 核激素受體結構
            1.1.2.1 調(diào)節(jié)結構域（modulator）
            1.1.2.2 DNA結合結構域（DNA-binding domain, DBD）
            1.1.2.3 鉸鏈區(qū)（hinge region）
            1.1.2.4 配體結合結構域（ligand-binding domain, LBD）
        1.1.3 核激素受體發(fā)生作用的機制
        1.1.4 法呢醇X受體（Farnesoid X Receptor, FXR）
            1.1.4.1 FXR基因分類
            1.1.4.2 FXR結構
            1.1.4.3 共調(diào)節(jié)因子（coregulator）
            1.1.4.4 FXR與膽汁酸代謝
            1.1.4.5 FXR與肝保護
            1.1.4.6 FXR與肝再生
            1.1.4.7 FXR與炎癥反應
    1.2 三萜類化合物甘草次酸和齊墩果酸
        1.2.1 甘草次酸（6a）和甘草甜素（6b）
        1.2.2 齊墩果酸
第二章 前言
第三章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 質(zhì)粒和細胞系
            3.1.1.1 質(zhì)粒
            3.1.1.2 細胞系
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器及耗材
        3.1.4 溶液
    3.2 方法
        3.2.1 質(zhì)粒構建與表達
            3.2.1.1 質(zhì)粒構建
            3.2.1.2 感受態(tài)制作
            3.2.1.3 轉(zhuǎn)化
        3.2.2 細胞培養(yǎng)
            3.2.2.1 細胞復蘇
            3.2.2.2 細胞傳代
            3.2.2.3 細胞凍存
            3.2.2.4 細胞計數(shù)
            3.2.2.5 細胞活力檢測
        3.2.3 瞬時轉(zhuǎn)染
        3.2.4 實時定量PCR
            3.2.4.1 細胞總RNA提取
            3.2.4.2 逆轉(zhuǎn)錄PCR
        3.2.5 蛋白表達和純化
            3.2.5.1 蛋白表達
            3.2.5.2 蛋白純化
        3.2.6 BIAcore3000 分子間相互作用分析
        3.2.7 統(tǒng)計分析
第四章 結果與分析
    4.1 甘草次酸選擇性調(diào)節(jié)FXR
        4.1.1 GL30 下調(diào)CDCA引起的FXR-LBD活性
        4.1.2 LC/MS分析甘草甜素（GL）成分
        4.1.3 β-GA對FXR-LBD活性的影響
        4.1.4 β-GA對其他核激素受體活性的影響
        4.1.5 FXR表達與純化
        4.1.6 β-GA與FXR-LBD蛋白相互結合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白與共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.1.7 β-GA對SHP啟動子的影響
        4.1.8 β-GA對FXR靶基因的影響
        4.1.9 討論
    4.2 OA是FXR選擇性的調(diào)節(jié)子
        4.2.1 OA抑制FXR-LBD活性
        4.2.2 OA與FXR-LBD蛋白相互結合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白與共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.2.3 OA對FXR靶基因的影響
        4.2.4 討論
第五章 結論
參考文獻
附錄
致謝
攻讀碩士學位期間取得的與學位論文相關的成果



本文編號：3178758