乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV）是一種DNA病毒,能引起急性及慢性肝臟病變,每年有大約100萬人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌。肝炎的轉(zhuǎn)歸是宿主免疫與HBV體內(nèi)復(fù)制之間進行復(fù)雜的相互作用的最終結(jié)果,固有免疫是機體抵御病毒感染的第一道防線,發(fā)揮重要的抗病毒作用。人載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白3G（Apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic polypeptide 3 protein G,APOBEC3G）是被新發(fā)現(xiàn)的固有免疫分子中的一員,有廣泛的抗病毒作用。APOBEC3G通過與Gag結(jié)合進入艾滋病病毒-1（HIV-1）的病毒顆粒中并在逆轉(zhuǎn)錄時使脫氧胞嘧啶脫氨變?yōu)槊撗跄蜞奏?從而抑制病毒復(fù)制；之后也發(fā)現(xiàn)APOBEC3G以非脫氨形式抑制病毒復(fù)制。病毒侵染因子（Vif）介導(dǎo)APOBEC3G蛋白泛素化及蛋白酶體降解,使得HIV-1對抗APOBEC3G介導(dǎo)的抗病毒作用。近來有研究者指出APOBEC3G能抑制HBV DNA復(fù)制及蛋白表達,但是目前對其抗HBV的作用機制還不是很清楚。本研... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

細胞芯片實時監(jiān)測APOBEC3G對HePGZ細胞生長的影響

2.APOBEC3G過表達不影響HePGZ細胞的生長及接受外來基因的能力之前有研究表明AID、APOBECI轉(zhuǎn)基因鼠會引起各種各樣腫瘤的發(fā)生I’“，’”]，這里我們用細胞芯片實時觀察穩(wěn)定過表達APoBEc3G的HePGZ細胞80h，如圖1一2所示:HePGZA細胞的生長狀態(tài)與對照組相比沒有明顯差異，p>0.05。轉(zhuǎn)染pEGFP一Nl到HePGZA細胞中，HePGZ一3.1細胞作為對照，用流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率分別為50.3%和48.2%，平均熒光強度分別為50.7%和49.7%，沒有顯著性差異，p>0.05。熒光顯微鏡檢測得到同樣的結(jié)果，圖1一3。聲 6.0 5.0廠二盜護nU八U‘

為了阻斷NF一妞的激活，實驗中我們轉(zhuǎn)染PI.37質(zhì)粒到HePGZA和HePGZ一3.1細胞中，細胞用含有或不含有1林 MIMD一0354的培養(yǎng)基培養(yǎng)72h，然后用熒光定量PCR測 HBVDNA的變化。結(jié)果如圖1一5一B所示，加入IMD一0354后，ApOBEC3G對HBv復(fù)制的抑制效率只有42%，與沒加抑制劑的對照組相比有顯著性差異，p<0.05。6.APoBEc3G升高一些NF-KB調(diào)控的炎癥因子的表達NF一沼活化后能調(diào)控一些炎癥因子如IL一6、IL一8、IL一lp、TNF一a的表達，這里我們用熒光定量PcR選擇性分析了一些基因在HePGZA和H即GZ一3.1細胞中的表達情況，結(jié)果如圖1一6所示，IL一6、IL一8、IL一lp在H即GZA細胞中的表達都有上升，其中IL一8上升最明顯

【參考文獻】：
期刊論文
[1]APOBEC3G抗HIV-1的分子機制研究進展[J]. 樊博,岑山,蔣建東.  藥學(xué)學(xué)報. 2008(07)
[2]激光掃描共聚焦顯微鏡研究APOBEC3G蛋白的亞細胞定位[J]. 楊怡姝,李嵐,李澤琳,曾毅.  病毒學(xué)報. 2007(01)



本文編號：3074506