【研究目的】阻塞性黃疸存在著多種病理生理改變,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)阻塞性黃疸動物存在血管內(nèi)皮的損傷及創(chuàng)傷修復(fù)延遲。血管新生是創(chuàng)傷修復(fù)及手術(shù)后傷口修復(fù)的重要環(huán)節(jié),但是阻塞性黃疸是否直接抑制了創(chuàng)傷修復(fù)未見報道;而又是何種因素在血管內(nèi)皮損傷中發(fā)揮作用也尚未清楚。既往有關(guān)創(chuàng)傷修復(fù)及血管新生的報道也多與內(nèi)皮祖細(xì)胞相關(guān),但多與血管新生經(jīng)典VEGF信號通路相關(guān);本研究旨在對阻塞性黃疸、膽汁酸與其膜受體對內(nèi)皮祖細(xì)胞在缺血損傷修復(fù)中的作用進(jìn)行研究。【研究方法】本課題的主要研究方法為:（1）分析阻塞性黃疸對皮損創(chuàng)傷傷口修復(fù)的影響,采用免疫熒光傷口處的血管新生情況;（2）采用缺血損傷的經(jīng)典模型股動脈結(jié)扎分析阻塞性黃疸對缺血損傷修復(fù)的影響;（3）分別觀察膽汁酸與膽紅素對股動脈結(jié)扎后缺血損傷修復(fù)的影響;（4）體外分離培養(yǎng)原代內(nèi)皮祖細(xì)胞并采用免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)等多種方法進(jìn)行鑒定;（5）采用小干擾RNA對內(nèi)皮祖細(xì)胞膽汁酸核受體FXR與膜受體TGR5分別進(jìn)行干擾并采用Western blotting驗證,然后采用膽汁酸進(jìn)行孵育,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞的遷移與成管能力;（6）原代內(nèi)皮祖細(xì)胞采用膽汁酸進(jìn)行孵育后,PCR檢測多種... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照表
中文摘要
Abstract
前言
1 實驗材料
    1.1 .實驗動物
    1.2 實驗細(xì)胞
    1.3 實驗儀器設(shè)備和耗材
    1.4 試劑配劑
    1.5 主要試劑配方
2 實驗方法
    2.1 小鼠皮損創(chuàng)傷動物模型建立
    2.2 小鼠股動脈結(jié)扎模型建立
    2.3 流式細(xì)胞術(shù)
    2.4 激光多普勒血流掃描
    2.5 免疫熒光染色
    2.6 免疫組織化學(xué)染色
    2.7 免疫蛋白印記分析
    2.8 實時定量熒光PCR
    2.9 原代細(xì)胞分離培養(yǎng)
    2.10 小干擾RNA干擾實驗
    2.11 細(xì)胞劃痕實驗
    2.12 細(xì)胞成管實驗
    2.13 細(xì)胞Transwell實驗
    2.14 細(xì)胞回輸實驗
    2.15 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 阻塞性黃疸小鼠存在皮損創(chuàng)傷術(shù)后修復(fù)延遲現(xiàn)象
    3.2 阻塞性黃疸抑制股動脈結(jié)扎后血管新生
    3.3 膽汁酸而非膽紅素抑制股動脈結(jié)扎術(shù)后血流灌注與組織血管密度
    3.4 體外分離培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞并鑒定
    3.5 膽汁酸作用于內(nèi)皮祖細(xì)胞膽汁酸膜受體 TGR5 抑制內(nèi)皮祖細(xì)胞遷移、分化與成管能力。
    3.6 膽汁酸孵育抑制內(nèi)皮祖細(xì)胞各種促血管新生因子表達(dá)
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
7 綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
9 致謝



本文編號：3031423