目的肝組織損傷是各型肝臟疾病的共同病理基礎(chǔ),嚴(yán)重的肝組織損傷將引起肝功能衰竭;干細(xì)胞治療修復(fù)肝組織損傷是目前國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界研究的一個(gè)熱點(diǎn),但由于存在體外富集純化困難、定向分化機(jī)制不明等問題而使其應(yīng)用受到限制。胎肝細(xì)胞中富含的具有定向分化功能的干細(xì)胞是干細(xì)胞治療研究中的重要細(xì)胞來源。本研究擬探討建立體外擴(kuò)增大鼠胚胎肝干細(xì)胞并抑制其分化的培養(yǎng)條件及方法,并在此基礎(chǔ)上,將胎肝干細(xì)胞通過門靜脈植入肝損傷大鼠體內(nèi),觀察肝臟修復(fù)情況,檢測治療前后HNF4α表達(dá)變化,探討HNF4α在胎肝干細(xì)胞促進(jìn)肝組織損傷修復(fù)中的作用。本研究內(nèi)容共分為兩部分:1.體外瓊脂克隆培養(yǎng)對胎肝干細(xì)胞分化的影響;2.HNF4α在胎肝干細(xì)胞促肝組織損傷修復(fù)中的作用。探討這一重要調(diào)節(jié)過程中分子機(jī)理將為臨床應(yīng)用胎肝干細(xì)胞移植治療肝臟疾病奠定重要的基礎(chǔ)。方法1.無菌條件下利用Ⅳ型膠原酶結(jié)合機(jī)械消化法制備14d胎齡大鼠胎肝干細(xì)胞懸液。將原代分離得到的大鼠胎肝干細(xì)胞分成兩組,其中一組胚胎肝干細(xì)胞接種至Ⅰ型膠原包被的培養(yǎng)板中,常規(guī)貼壁培養(yǎng)。另一組細(xì)胞則接種至無血清軟瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng);懸浮培養(yǎng)基分為上下兩層,底層為含HGF的1.2%瓊... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

胎肝干細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與貼壁培養(yǎng)的比較

第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文P 表達(dá)明顯下降，ALB 的表達(dá)呈明顯上升的趨勢（P<0.01）。而懸浮培的胎肝干細(xì)胞 AFP 和 ALB 的表達(dá)在培養(yǎng)前后未見明顯變化（P>0.05）圖 5、6）

實(shí)時(shí)定量PCR分析AFPmRNA培養(yǎng)前后的表達(dá)變化


本文編號(hào)：2951016