炎癥性腸病(IBD)是一組病因不明的慢性腸道疾病,主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(UC)和克羅恩病(CD)。近年在我國病例報告逐年增加,呈明顯上升趨勢。目前IBD的病因和發(fā)病機制尚不清楚,研究認為遺傳、環(huán)境、免疫三者相互作用參與IBD發(fā)病,并可能決定臨床表型。近年國內(nèi)外學(xué)者對IBD遺傳因素的研究發(fā)現(xiàn)基因突變除與疾病易感性相關(guān)外,與某些疾病表型也相關(guān),如NOD2突變在回腸CD為多。作為第一個CD易感基因,NOD2的發(fā)現(xiàn)具有劃時代的意義,它提示IBD發(fā)病與腸道細菌及自然免疫相關(guān)。DEFB1和ATG16L1屬免疫防御功能相關(guān)基因,有研究發(fā)現(xiàn)DEFB1多態(tài)性與CD相關(guān),在我國尚無相關(guān)報道。ATG16L1作為新近確定的CD易感基因,在高加索人群研究中得到較好的重復(fù),而在我國尚無相對大樣本的研究。 除遺傳因素之外,一些特異性抗體可能作為IBD與免疫反應(yīng)有關(guān)的表現(xiàn)而受到重視,包括抗中性粒細胞胞漿抗體(Antineutrophil ctyoplasmic antibodies,p-ANCA)、抗釀酒酵母菌抗體(Anti-saccharomyces cerevisiae antibodies,ASCA)、抗胰外分泌腺抗體(Pancreatic antibodies,PAB)和抗小腸杯狀細胞抗體(Goblet cellautoantibodies,GAB)等,四種抗體檢測在國外廣泛用于IBD的診斷,但在中國人群中報道較多的為p-ANCA和ASCA,二者聯(lián)合檢測診斷IBD敏感性較低,且不同中心的研究結(jié)果不甚一致,而PAB和GAB國內(nèi)報道較少,且上述抗體與臨床表型的關(guān)系報道尚有爭議。 IBD為異質(zhì)性疾病,基于遺傳學(xué)異質(zhì)性和血清學(xué)異質(zhì)性的研究可準確界定IBD臨床分型,有助于治療方案的細化和預(yù)后的判定。因此本研究從IBD遺傳易感性和相關(guān)抗體檢測著手,立足于國內(nèi)現(xiàn)有試驗條件,研究旨在: 1.探討自然免疫相關(guān)基因DEFB1和ATG16L1單核甘酸多態(tài)性與IBD遺傳易感性的關(guān)系以及與IBD臨床表型的可能關(guān)聯(lián); 2.探討p-ANCA、ASCA、PAB和GAB聯(lián)合檢測對IBD診斷及鑒別診斷的應(yīng)用價值以及與IBDI臨床表型的可能關(guān)聯(lián)。 第一部分中國漢族人群ATG16L1和DEFB1基因多態(tài)性與炎癥性腸病遺傳易感性的關(guān)聯(lián)性研究 方法:本研究采用醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例—對照研究設(shè)計,對247例無血緣關(guān)系的我國漢族IBD患者(150例UC,97例CD)以及200例正常對照者,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長度多態(tài)性(Polymerase chain reaction—restricted fragment lengthpolymophism,PCR-RFLP)方法和部分樣本(10%)測序方法,檢測DEFB1基因(rs11362和rs1800972位點)和ATG16L1基因(rs2241880和rs1045095位點)多態(tài)性,并分析上述基因多態(tài)性與IBD臨床特征的關(guān)系。 結(jié)果: 1、DEFB1基因rs11362多態(tài)與UC患病風險增加相關(guān),攜帶rs11362GG基因型個體患UC風險是攜帶AA和GA基因型個體的2.04倍(95%CI:1.32-3.06,P=0.0013)。 2、單體型分析表明攜帶DEFB1基因rs11362和rs1800972G-C單體型個體患UC風險是攜帶A-C單體型個體的1.621倍(95%CI:1.010-2.610,P=0.035); 3、基因型與表型關(guān)聯(lián)分析表明DEFB1基因rs11362多態(tài)與UC臨床表型相關(guān),診斷年齡≤25歲UC患者攜帶DEFB1基因rs11362位點GG基因型顯著高于與正常對照(P=0.001,OR=3.29,95%CI:1.56-7.09),病變累及全結(jié)腸者攜帶GG基因型顯著高于正常對照(P=0.003,OR=2.27,95%CI:1.31-3.91),重度結(jié)腸炎患者攜帶GG基因型顯著高于正常對照(P=0.009,OR=2.55,95%CI:1.24—5.24); 小結(jié):DEFB1基因單核甘酸多態(tài)性不僅與我國漢族人群UC易感性相關(guān),而且與發(fā)病早、重度及廣泛結(jié)腸炎相關(guān)。 第二部分中國人炎癥性腸病血清學(xué)標志物聯(lián)合檢測的臨床意義 方法:本研究對217例IBD患者(UC108例,CD109例)、59例非IBD腸道疾病患者以及112例正常對照者,應(yīng)用ELISA法檢測ASCA,IIF法檢測p-ANCA、PAB和GAB。 結(jié)果: 1.不同抗體在IBD中分布:UC中p-ANCA和GAB陽性率分別為60.2%和30.6%,均高于CD、疾病對照和正常對照,CD中ASCA和PAB陽性率分別為34.9%和41.3%,均高于UC、疾病對照和正常對照;p-ANCA陰性UC中僅有13.6%(6/44)病人GAB陽性,ASCA陰性CD中34.3%(24/70)病人PAB陽性; 2.四種抗體聯(lián)合檢測對IBD診斷的意義:p-ANCA和GAB單項檢測診斷UC敏感性分別為59.3%和27.8%,二者聯(lián)合檢測診斷UC敏感性可提高至64.8%;ASCA和PAB單項檢測診斷CD敏感性均為35.8%,二者聯(lián)合檢測診斷CD敏感性可提高至57.8%; 3.四種抗體聯(lián)合檢測對IBD鑒別診斷的意義:ASCA+p-ANCA-對于CD和UC的鑒別診斷敏感性57.8%,特異性96.3%,聯(lián)合PAB和GAB檢測特異性和陽性預(yù)測值均為100%,但敏感性僅為12.8%;p-ANCA+ASCA-對于UC和CD的鑒別診斷敏感性50%,特異性94.5%,聯(lián)合GAB和PAB檢測特異性和陽性預(yù)測值均達100%,但敏感性僅為19.4%; 4.四種抗體檢測在結(jié)腸CD和UC鑒別診斷中的意義:ASCA+p-ANCA-診斷結(jié)腸CD敏感性、特異性分別為60%和96.3%,陽性預(yù)測值為28.6%,聯(lián)合PAB和GAB檢測雖特異性和陽性預(yù)測值均提高至100%,而敏感性僅為0.9%。p-ANCA+ASCA-鑒別UC的敏感性和特異性50%和94.5%,陰性預(yù)測值為28.9%,聯(lián)合GAB和PAB檢測特異性和陽性預(yù)測值均達100%,但敏感性僅為16.7%; 5.四種抗體檢測在IBD與非IBD腸病的鑒別診斷中的意義:各抗體單項檢測診斷IBD的特異性基本在95%以上,其中GAB可達100%;對于聯(lián)合檢測而言,PAB和GAB組合診斷IBD的特異性96.6%,高于p-ANCA和ASCA組合; 6.四種抗體與IBD臨床特征的關(guān)系:未發(fā)現(xiàn)UC病人p-ANCA和GAB、CD病人ASCA與臨床特征有關(guān)。診斷年齡≤40組CD病人血清PAB陽性率為43.2%,診斷年齡40歲組CD病人PAB陽性率20%,二者比較差異顯著(P=0.018);有腸外表現(xiàn)者CD病人血清PAB陽性率明顯高于無腸外表現(xiàn)者(58.8%vs 31.5%,P=0.031)。 小結(jié): 1、多數(shù)UC患者可檢測到p-ANCA和ASCA,多數(shù)CD患者可檢測到ASCA和PAB; 2、p-ANCA聯(lián)合GAB檢測可提高UC診斷的敏感性,ASCA聯(lián)合PAB檢測可提高CD診斷的敏感性; 3、四種抗體聯(lián)合檢測較p-ANCA和ASCA更有助于IBD的鑒別診斷,同時亦有助于結(jié)腸CD和UC的鑒別; 4、GAB檢測有助于IBD與非IBD腸道疾病的鑒別; 5、PAB與CD發(fā)病早、腸外表現(xiàn)有關(guān)。 結(jié)論: 1、DEFB1基因單核甘酸多態(tài)性不僅與我國漢族人群UC易感性相關(guān),而且與發(fā)病早、重度及廣泛結(jié)腸炎相關(guān); 2、ATG16L1基因單核甘酸多態(tài)性與我國漢族人群IBD無關(guān); 3、p-ANCA、ASCA、PAB和GAB四種抗體聯(lián)合檢測較p-ANCA和ASCA兩種抗體聯(lián)合檢測更有助于IBD的鑒別診斷,同時亦有助于結(jié)腸CD和UC的鑒別; 4、PAB與CD發(fā)病早、腸外表現(xiàn)有關(guān)。
【學(xué)位單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R574
【部分圖文】：

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5ATG16LI基因作104犯好位點擴增產(chǎn)物檢M:入h攻er1-3:擴增P以產(chǎn)物(33、因多態(tài)性分析Sll362位點G等位基因的PCR產(chǎn)物00經(jīng)scrFx酶切后產(chǎn)生一43bp和1125bp三個片段;而野生型AA不含8bp片段。圖1一6所示為含rsl1362位8%Page膠電泳圖。

【引證文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 謝靖;王志紅;付蕾;武子濤;韓英;;潰瘍性結(jié)腸炎患者食物不耐受及血清學(xué)標記物相關(guān)性分析[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2012年09期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 謝靖;潰瘍性結(jié)腸炎患者血清學(xué)標志物及食物不耐受相關(guān)性分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號：2833712