腸易激綜合征(IBS)是一種常見的以腹痛／腹部不適伴排便習慣改變?yōu)樘卣鞯墓δ苄阅c病,缺乏形態(tài)學和生化學改變的生物學標志。IBS的發(fā)病機制迄今仍不明確,現(xiàn)在普遍認為是多種因素綜合作用的結(jié)果,其中心理、精神、社會和環(huán)境等因素在發(fā)病過程中起重要作用,同時受神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的制約,導致腸道平滑肌運動障礙和內(nèi)臟感覺異常。在此基礎上,當機體受到某些誘因刺激時就會引起腸道易激和過激的功能反應,導致一系列臨床癥狀。其癥狀發(fā)生的直接機制是基于腸道高敏感性和高反應性基礎上的腸道運動功能異常。本文通過文獻回顧了IBS的發(fā)病、致病機理、診斷治療及腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(Corticotropin-releasing hormone, CRH)通路和肥大細胞在IBS致病作用的研究。 目的 本課題旨在通過IBS大鼠模型實驗研究,探討腸易激綜合征的發(fā)生是否與腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(Corticotropin-releasing hormone, CRH)通路和肥大細胞相關(guān)。從而加深我們對腸易激綜合征的發(fā)病機制的認識,并有助于解釋中藥康泰復方治療腸易激綜合征的作用途徑及機制,為心胃相關(guān)理論治療腸易激綜合征的現(xiàn)代化生物學基礎提供科學根據(jù)及理論支持。 方法 將育齡7天的新生SD大鼠共110只隨機分出正常對照組10只,其中100只利用幼鼠母子分離加直腸刺激法復制大鼠IBS內(nèi)臟高敏感性模型,造模成功后按體重隨機分出模型組、中藥高、中、低劑量組,和西藥馬來酸曲美布汀對照組各20只。給藥兩周后運用放射免疫法檢測大鼠模型下丘腦、腦干CRH水平,免疫組化法檢測IBS內(nèi)臟高敏感性大鼠腸粘膜肥大細胞數(shù)目、活化狀態(tài)(c-fos基因表達情況)及中藥康泰復方對其影響；并與模型組及馬來酸曲美布汀組進行比較。 結(jié)果 1正常大鼠與造模大鼠不同時期體重變化 用幼鼠母子分離加直腸刺激法復制內(nèi)臟高敏感性IBS大鼠與正常對照組大鼠體重變化無顯著性差異(P0.05),說明本法造模不會影響大鼠的正常狀態(tài)。2大鼠在清醒狀態(tài)下,逐漸加壓擴張腸道,觀察大鼠腹部抬起與背部拱起的血壓計的壓力平均值,采用幼鼠母子分離加直腸刺激法復制內(nèi)臟高敏感性IBS大鼠模型,在大鼠出生后第六周其內(nèi)臟高敏感性顯著升高(P0.05),說明造模成功。 3、IBS內(nèi)臟高敏感性大鼠經(jīng)康泰膠囊治療2周后,用藥組大鼠內(nèi)臟高敏感性明顯降低(P0.05),且中、高劑量治療組已恢復到接近正常水平(P0.05)。提示康泰膠囊對IBS模型大鼠內(nèi)臟高敏感性有改善作用。 4、康泰膠囊治療后,用幼鼠母子分離加直腸刺激法復制內(nèi)臟高敏感性IBS大鼠與正常對照組大鼠體重、活動、毛發(fā)光澤無顯著性差異(P0.05),說明康泰膠囊是安全的,不存在明顯的副作用。 5、與正常組相比,模型組大鼠下丘腦CRH含量明顯升高,兩組間比較P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。 6、與模型組相比,西藥組、中藥高、中、低劑量組大鼠下丘腦CRH水平均有所降低。其中,西藥組、中藥康泰復方高、中劑量組與模型組相比P0.05,差異均有統(tǒng)計學意義；中藥低劑量組與模型組相比雖無統(tǒng)計學差異,但仍存在下降的趨勢。 7、與正常組相比,模型組大鼠腦干CRH含量明顯升高,兩組間比較P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。 8、與模型組相比,西藥組、中藥高、中、低劑量組大鼠腦干CRH水平均有所降低。其中,西藥組、中藥康泰復方高、中劑量組與模型組相比P0.05,差異均有統(tǒng)計學意義；中藥低劑量組與模型組相比雖無統(tǒng)計學差異,但仍存在下降的趨勢。 9、光鏡下觀察c-Fos表達染色呈棕黃色,與正常組相比,模型組大鼠結(jié)腸遠端肥大細胞c-fos表達水平明顯升高,兩組間比較P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。 10、與模型組相比,西藥組、中藥高、中、低劑量組大鼠結(jié)腸遠端肥大細胞c-fos基因表達水平均有所降低。其中,西藥組、中藥康泰復方高、中、低劑量組與模型組相比P0.05,差異均有統(tǒng)計學意義；并且,中藥中藥康泰復方用藥劑量與鼠結(jié)腸遠端肥大細胞c-fos基因表達水平呈負相關(guān)。 結(jié)論 1.D-IBS大鼠腦干、下丘腦CRH含量表達的升高提示其表達改變與D-IBS的發(fā)病相關(guān)。 2.中藥康泰復方是治療IBS-D安全有效的方劑。 3.基于心胃相關(guān)理論組方的中藥康泰復方能降低IBS-D高敏性大鼠腦干、下丘腦CRH含量,其作用機制可能是與影響腦腸軸CRH通路有關(guān)。 4、用科學的研究方法的出實驗結(jié)果證實了周福生教授提出的“心胃相關(guān)理論”的正確性。
【學位單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R574
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
引言
第一章 文獻綜述
    第一節(jié) 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        一、流行病學研究
        二、病因?qū)W研究
            1. 精神心理因素
            2. 胃腸動力學障礙
            3. 腸道感染
            4. 免疫學機制
            5. 內(nèi)臟高敏感性
            6. 其他因素
        三、診斷腸易激綜合征的輔助檢查
        四、腸易激綜合征的診斷標準與分型
            1 國際標準
            2 國內(nèi)標準
        五、中醫(yī)學對IBS的辯證診斷及治療
            1 中醫(yī)病因
            2 中醫(yī)病機
        六、IBS的中醫(yī)治療
        七、IBS的現(xiàn)代醫(yī)學治療
            1、IBS的一線治療方案
            2、IBS的二線治療方案
            3、IBS的三線治療方案
    第二節(jié) 腦腸軸CRH在IBS發(fā)病中的作用
        一、腦-腸互動與IBS
        二、CRH通路與IBS
            1 CRH對胃腸運動功能的直接影響
            2. CRH與情志因素的相互關(guān)聯(lián)
    第三節(jié) 腸易激綜合征與肥大細胞
        一、肥大細胞的功能
        二、肥大細胞與IBS相關(guān)的證據(jù)
        三、肥大細胞和內(nèi)臟感覺過敏
        四、肥大細胞與腸動力異常
        五、肥大細胞在IBS免疫機制中的作用
        六、結(jié)語
    第四節(jié) IBS動物模型研究
        一、IBS動物模型的制備
            1 感染、炎癥導致的IBS動物模型
            2 結(jié)腸和直腸刺激導致的IBS動物模型
            3 應激引起的IBS動物模型
            4 神經(jīng)-內(nèi)分泌因素導致的IBS動物模型
            5 早期生活事件導致IBS動物模型
            6 冰水灌胃致便秘型IBS的動物模型
        二、IBS動物模型制備研究進展
            1 食物及藥物過敏導致的IBS動物模型
            2 細菌潛生體相關(guān)的IBS動物模型
    第五節(jié) 心胃相關(guān)理論內(nèi)涵與外延
        一、心胃相關(guān)的涵義
        二、心胃相關(guān)的現(xiàn)代物質(zhì)基礎研究
        三、安神和胃法的內(nèi)涵探討
        四、心胃相關(guān)與臟腑相關(guān)
        五、情志與五臟相關(guān)的探討
    第六節(jié) 回顧與評價
第二章 研究方法和材料
    第一節(jié) 造模方法及評估
        一、造模方法
        二、實驗材料
        三、給藥方法及分組
        四、腹部回縮反射(AWR)的壓力閾值檢測
    第二節(jié) 檢測項目及方法
        一、樣本的收集與處理
        二、射免疫測定方法(radioimmunoassy,RIA)檢測IBS內(nèi)臟高敏感性大鼠下丘腦及腦干CRH水平及中藥康泰復方對其影響
        三、c-Fos的免疫組化法檢測IBS內(nèi)臟高敏感性大鼠腸粘膜肥大細胞數(shù)目、活化狀態(tài)(c-fos基因表達情況)及中藥康泰復方對其影響
第三章 實驗結(jié)果及分析
    第一節(jié) 大鼠一般情況變化
    第二節(jié) 判斷造模成功與否
    第三節(jié) 基于心胃相關(guān)理論中藥組方康泰膠囊治療IBS大鼠前后比較
        一、康泰膠囊治療后IBS大鼠內(nèi)臟高敏感性差異
        二、康泰膠囊治療后內(nèi)臟高敏感性IBS大鼠體重變化
        三、各組大鼠下丘腦CRH水平變化及中藥康泰復方對其影響
        四、各組大鼠腦干CRH水平變化及中藥康泰復方對其影響
        五、各組大鼠遠端腸粘膜肥大細胞中C-fos活化狀態(tài)
第四章 實驗結(jié)論及探討
    第一節(jié) 內(nèi)臟高敏感動物模型的建立及評價
    第二節(jié) 各組大鼠下丘腦及血漿腦干中CRH含量的變化及其意義
        一、CRH對胃腸運動功能的直接影響
        二、情緒改變和心理應激與IBS
        三、肥大細胞與IBS
    第四節(jié) 心胃相關(guān)理論對臨床的指導意義
        一、在腸易激綜合征(IBS)辨治中的運用
        二、跟師過程中心胃相關(guān)理論指導臨床辯證論治經(jīng)典病案
        三、小結(jié)
    第五節(jié) 不足與展望
        一、正確地評估動物疾病模型
        二、平衡中醫(yī)辯證論治多樣性與實驗可重復性
        三、創(chuàng)新與展望
參考文獻
研究生在學期間發(fā)表論文情況
致謝

【引證文獻】

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1 張明明;吳璐一;張淑靜;劉希茹;劉慧榮;戚莉;豐曉溟;崔云華;;肥大細胞在內(nèi)臟高敏感發(fā)生及針灸治療中的作用[J];山西中醫(yī);2013年04期

本文編號：2827224