【摘要】： 目的: 觀察促炎性細(xì)胞因子IL-32在克羅恩病(Crohn’s disease)患者腸黏膜中的表達(dá)情況,研究CARD15、IRGM、ATG16L1、NKX2-3基因的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNP)位點(diǎn)與中國人克羅恩病易感性的關(guān)系,為深入研究克羅恩病的發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ),亦為該病的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: ⑴收集臨床確診的克羅恩病患者(47例)及其健康對(duì)照(16名)的組織標(biāo)本,經(jīng)病理檢驗(yàn),通過免疫組化以及western blot方法觀察IL-32在克羅恩病患者腸黏膜內(nèi)的表達(dá)情況,檢驗(yàn)IL-32在克羅恩病患者腸黏膜中的表達(dá)與意義。⑵提取克羅恩病患者(32例)和健康對(duì)照個(gè)體(30名)的外周血,抽提白細(xì)胞基因組DNA,檢測CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_ rs10883365的SNP多態(tài)性與克羅恩病的關(guān)系,根據(jù)靶序列片段設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物,PCR擴(kuò)增目的片段,經(jīng)純化后測序,測序結(jié)果分組做統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果: ⑴與對(duì)照相比,經(jīng)免疫組化法和western blot法檢測的IL-32在克羅恩病患者腸黏膜中表達(dá)上調(diào),二者的表達(dá)量有顯著性差異(P㩳0.05)。⑵克羅恩病病例組和健康對(duì)照組基因頻率和基因型頻率的組間比較顯示: CARD15_rs2066842、IRGM_rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及NKX2-3_rs10883365的SNP分布頻率的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㧐0.05)。提示這四個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn)可能與中國人克羅恩病的易感性無關(guān)。 結(jié)論: ⑴IL-32無論在克羅恩病患者還是在健康對(duì)照個(gè)體的腸黏膜內(nèi)均有表達(dá),但在克羅恩病患者腸黏膜內(nèi)IL-32表達(dá)上調(diào),研究顯示IL-32表達(dá)上調(diào)能加重克羅恩病的炎癥反應(yīng)。⑵國外研究報(bào)道的與高加索人克羅恩病相關(guān)的CARD15_rs2066842,IRGM_ rs13361189、ATG16L1_rs2241880以及與日本人克羅恩病易感性的NKX2-3_rs10883365的SNP位點(diǎn)可能與我國克羅恩病患者的易感性無關(guān),這些SNP的變異至多是增加了中國人罹患克羅恩病的風(fēng)險(xiǎn)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R574.62
【圖文】：

圖 1. 克羅恩病的發(fā)病機(jī)制示意圖Fig.1. schematic of Pathogenesis of Crohn's disease注：圖片來源于 Renzo Caprilli, Why does Crohn's disease usually occur interminal ileum? Journal of Crohn's and Colitis （2008） 2, 352 356腸腔是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，廣闊的表面時(shí)刻都接觸大量抗原，能區(qū)分食物和共生菌中的侵入病原體和無害抗原。當(dāng)克羅恩病發(fā)生時(shí)，對(duì)無害抗原耐受性丟失。防御機(jī)制受集合淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、隱窩小結(jié)、淋巴細(xì)胞等腸相關(guān)淋巴樣組織（gut-associated lymphoid tissue，GALT）的調(diào)節(jié)[4]。集合淋巴結(jié)是由免疫細(xì)胞組成的結(jié)構(gòu)，數(shù)量眾多，分布于小腸特別在回腸末端，是 GALT 最復(fù)雜的一部分，與回腸克羅恩病部位一致�？肆_恩病的發(fā)病高峰在 15～25 歲，一個(gè)相似的平行峰代表了集合淋巴結(jié)可以與年齡相對(duì)應(yīng)[5]。此外，CARD15 缺陷通過免疫系統(tǒng)過度反應(yīng)誘導(dǎo)集合淋巴結(jié)發(fā)育異常，增加了腸黏膜的通透性[6]。

_IL-32在克羅愚病感者腸貓浪中的衰達(dá)Fg_3..TheexpressionsofIL-321的theirdestirii}mucusawithCrnlnsdsease

結(jié) 果1 CARD15_rs2066842 單核苷酸多態(tài)性與克羅恩病的相關(guān)性1.1 CARD15_rs2066842 PCR 基因擴(kuò)增片段的電泳結(jié)果（見圖 5A）圖 5A 為 CARD15_rs2066842 PCR 產(chǎn)物電泳圖，擴(kuò)增的目的片段為 484bp

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 龍靖華;智發(fā)朝;張迎春;張以洋;鐘長青;姚國鵬;陳正彥;林勇;智佳;關(guān)婧;;NOD2/CARD15基因突變與中國人克羅恩病相關(guān)性的研究[J];胃腸病學(xué);2007年06期

2 龐智;李美芬;皇甫照;周春立;沈必武;;中國漢族炎癥性腸病幽門螺桿菌感染狀況分析[J];世界華人消化雜志;2009年35期

3 鄭家駒;趙凝;龐智;吳士良;;CARD15基因突變與中國人克羅恩病易感性的關(guān)系[J];中華消化雜志;2007年04期

本文編號(hào)：2754185