【摘要】：骨髓單個核細胞(bone marrow mononuclear cells, BMMCs)移植能夠促進組織或器官的再生及損傷的修復,特別是在急性損傷肝臟的再生及修復方面可以發(fā)揮良好的治療作用；但是,在臨床實踐中這種治療潛能需要進一步提高,才能夠使BMMCs移植治療肝臟疾病得以發(fā)揮更加重要的作用。肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor, HGF)在肝細胞的發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。在相關動物模型的研究中已經(jīng)證實：HGF能夠減輕肝臟的纖維化。為了探索聯(lián)合應用HGF及BMMCs移植是否能夠促進損傷肝臟的再生,我們進行了此項實驗研究。在本實驗中,我們采用了經(jīng)典的四氯化碳腹腔注射的方法構建了Balb/c小鼠急性肝臟損傷模型,然后將構建好的急性肝臟損傷模型小鼠作為受體組隨機分為四組,即：①BMMCs+HGF組：急性肝臟損傷模型小鼠尾靜脈輸注經(jīng)PKH26熒光染料預先標記的BMMC(5x106 cells/mice),同時腹腔注射HGF(50ng/kg.d×7 d);②MMCs組：急性肝臟損傷模型小鼠僅經(jīng)尾靜脈輸注PKH26熒光染料預先標記的BMMC(5×106 cells/mice);③HGF組：急性肝臟損傷模型小鼠僅給予腹腔注射HGF (50 ng/kg.d×7d);④對照組：急性肝臟損傷模型小鼠僅給予腹腔注射0.9%生理鹽水(0.3ml/d×7 d)。將同批次健康的Balb/c小鼠作為供體組。無菌操作下采用密度梯度離心的方法分離提取BMMCs,經(jīng)PKH26熒光染料標記后移植給受體組。然后,在移植前后的第0、1、2、3及4周分別進行免疫組織化學檢測及免疫熒光檢測來判斷肝臟組織形態(tài)學變化；通過檢測血清生化指標來觀察肝臟功能恢復情況；進而分析應用HGF與BMMCs移植在肝臟損傷修復過程中能否起到“疊加”作用。實驗結果表明：經(jīng)PKH26預標記的BMMCs能夠在受體組的肝臟中檢測到,而且這些移植的細胞能夠同時表達核增殖抗原及白蛋白。經(jīng)體示學的方法比較證實了,BMMCs+HGF組小鼠肝臟的核增殖抗原及白蛋白的表達均較其它3組明顯增加。血清肝功能檢測證實,BMMCs+HGF組小鼠血清ALT及AST在移植后的不同時間點均較對照組明顯好轉。單因素方差分析結果表明P0.05,統(tǒng)計學上具有顯著性差異。本研究創(chuàng)新點主要是發(fā)現(xiàn)應用HGF聯(lián)合BMMCs移植能夠促進小鼠急性損傷肝臟再生及修復。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R575.3

【參考文獻】

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1 Claudia Lange;Helge Bruns;Dietrich Kluth;Axel R Zander;Henning C Fiegel;;Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells in cocultures with fetal liver cells[J];World Journal of Gastroenterology;2006年15期

2 ;Stromal cell derived factor-1 enhances bone marrow mononuclear cell migration in mice with acute liver failure[J];World Journal of Gastroenterology;2009年21期

本文編號：2731417