【摘要】： 目的 探討血小板活化因子受體(PAF-R)拮抗劑BN52021在大鼠重癥急性胰腺炎(SAP)早期病程中的作用和機制。 方法 1.用免疫組織化學染色方法研究PAF-R在Wistar大鼠胰腺的定位和分布。 2.用胰膽管插入逆行注射�；悄懰徕c制備SAP大鼠模型;用藥代動力學方法研究BN52021治療大鼠SAP的最佳量效關系。 3.用RT-PCR和Western blot方法分別研究PAF-R和核因子κB單體(NF-κBp65) mRNA和蛋白質在SAP大鼠胰腺組織的動態(tài)變化以及BN52021的影響。 結果 1.冰凍切片中顯示在Wistar大鼠正常胰腺組織微血管內皮細胞有PAF-R表達;石蠟切片中顯示胰島細胞有PAF-R表達,主要分布于細胞漿和細胞核,核膜著色較深,但是血管內皮細胞著色較淺。 2.血清淀粉酶、PLA2、腹水、胰腺組織病理學和胰腺組織PAF-R mRNA表達的結果顯示在2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10.0 mg/kg BN52021三個劑量中,5.0mg/kg BN52021靜脈注射給Wistar大鼠治療SAP具有最佳的量效關系(P0.05);這些結果也顯示SAP模型制備是成功的。 3.PAF-R mRNA結果顯示,SAP模型(SAP組)和BN52021治療后(BN組)均是動態(tài)變化的,早期逐漸上升,在3h達到高峰,以后逐漸降低,除1h和2h外其余各時相點與假手術動物(SO組)相比有顯著性差異(P0.05),除6h外BN組與SAP組各時相點之間無顯著性差異;PAF-R蛋白質結果顯示,SAP組和BN組PAF-R蛋白質與PAF-R mRNA的變化趨勢基本是一致的,先升后降,除1h外其余各時相點與SO組有顯著性差異(P0.05),BN組與SAP組各時相點之間無顯著性差異。 4.NF-κBp65mRNA結果顯示,SAP組和BN組均是動態(tài)變化的,呈雙峰改變,SAP組雙峰頂分別在1h和24h,BN組雙峰頂分別在1h和12h,于6h降至最低,SAP組在2h、3h、12h和24h較SO組顯著增加(P0.05),BN組在1h較SAP組顯著增加(P0.05),BN組各時相點較SO組顯著升高(P0.05);NF-?Bp65蛋白質結果顯示,SAP組在1h,3h和6h較SO組顯著升高(P0.01),在2h,12h和24h較SO組也顯著升高(P0.05),BN組各時相點較SO組顯著升高(P0.05),在1h,3h和6h較SAP組顯著降低(P0.05)。 結論 1.研究發(fā)現(xiàn)PAF-R不僅定位分布于Wistar大鼠胰腺微血管內皮細胞,也定位分布于其胰腺胰島細胞胞漿和細胞核內。 2.經(jīng)胰膽管插入逆行注射�；悄懰徕c制備SAP大鼠模型是可靠的;用5.0mg/kg BN52021靜脈注射治療Wistar大鼠SAP具有最佳的量效關系。 3.PAF-R在SAP大鼠胰腺組織表達是動態(tài)變化的,PAF-R可能參與了SAP的發(fā)病機制,對SAP病情的發(fā)生發(fā)展起一定的作用;BN52021可降低SAP血清淀粉酶和改善其病理變化,但對胰腺組織PAF-R的表達無顯著影響。分析認為,BN52021治療SAP大鼠并不是通過調控胰腺組織PAF-R的表達量,而是通過競爭性抑制上升的PAF與同時表達量上升的PAF-R結合,從而影響PAF-R的信號轉導,實現(xiàn)它的治療作用。 4.NF-kB是PAF-R信號轉導通路下游的關鍵成分。NF-kBp65在SAP大鼠胰腺組織表達是動態(tài)變化的,NF-kBp65可能參與了SAP的發(fā)病機制,對SAP病情的發(fā)生發(fā)展起一定的作用;BN52021在早期可降低NF-κBp65蛋白質的表達,從而發(fā)揮一定的治療作用。
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R576
【圖文】：

胰腺冰凍切片示血管×200Fig1-1Frozensectionofpancreasinsham

圖 1-1 胰腺冰凍切片示血管×200Fig1-1 Frozen section of pancreas in shamoperation group圖 1-2 胰腺組織×200Fig1-2 Paraffin section of pancreas in shamoperation group

【參考文獻】

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本文編號：2718446