【摘要】：目的脂聯(lián)素基因(Apm-1)多態(tài)性是近年研究多囊卵巢綜合征(PCOS)及非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)遺傳易感性風險的熱點之一。本研究主要通過檢測脂聯(lián)素基因第二外顯子第45位及第二內含子第276位點多態(tài)性的分布,分析脂聯(lián)素基因多態(tài)性及臨床影響因素與PCOS并發(fā)NAFLD的相關性,分析脂聯(lián)素基因多態(tài)性頻率分布和血清脂聯(lián)素水平的關系,探討脂聯(lián)素基因第二外顯子第45位及第二內含子第276位點多態(tài)性與PCOS并發(fā)NAFLD遺傳易感性的關系,為防治PCOS并發(fā)NAFLD的發(fā)生提供理論依據(jù)。 方法采用病例對照研究,選取2008年3月至2009年9月期間在唐山市婦幼保健院生殖中心不孕門診收治的單純PCOS患者100例作為對照組、PCOS并發(fā)NAFLD患者100例作為病例組。采用面對面的方式填寫調查表,收集調查對象的一般情況包括年齡、腰圍、臀圍、身高、體重、飲酒等資料;采用全自動生化儀測定各種規(guī)定的生化指標;采用放射免疫法檢測血清胰島素;采用免疫化學發(fā)光法檢測生殖激素;應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血清脂聯(lián)素水平;應用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)法(PCR RFLP即polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism)檢測其Apm-1 45TG、276GT基因多態(tài)性。采用SPSS16.0統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料兩組間比較用t檢驗,兩組以上比較用方差分析,計數(shù)資料采用x2檢驗并用多因素非條件Logistic回歸分析來控制其他混淆變量。 結果在研究人群中經過統(tǒng)計分析得出如下結果: (1)兩組研究對象基因型分布符合Hardy-weinberg平衡,研究對象年齡與BMI構成無差異。 (2)腰圍、腰臀比、CHOL、TG、LDL、IR指數(shù)在病例組中明顯高于對照組,是PCOS并發(fā)為NAFLD的危險因素,而血清脂聯(lián)素水平和HDL在病例組中明顯低于對照組,是PCOS并發(fā)為NAFLD的保護因素。 (3) Apm-1 45TG多態(tài)性位點三種基因型在病例組/對照組中的分布為:T/T型71%/72%,G/T型25%/20%,G/G型4%/8%;兩種等位基因頻率在病例組/對照組中的分布為:T 84%/82%,G 16%/18%。45TG多態(tài)性位點基因型頻率和等位基因頻率在兩組中的比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Apm-1276GT多態(tài)性位點三種基因型在病例組/對照組中的分布為:T/T型8%/16%,G/T型36%/51%,G/G型56%/33%;兩種等位基因頻率在病例組/對照組中的分布為:T 26%/42%,G 74%/58%。276GT多態(tài)性位點基因型頻率和等位基因頻率在兩組中的比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (4) Apm-1 276GT基因型頻率的相對風險分析,基因型T/T和G/T攜帶者患PCOS并發(fā)NAFLD的風險是基因型G/G攜帶者的0.387倍(95%CI: 0.218-0.687, P0.05)。 (5) Apm-145TG三種基因型之間的血清脂聯(lián)素水平沒有差別(p0.05);Apm-1 276GT多態(tài)性位點,突變等位基因276T(T/T、G/T基因型)攜帶者的血清脂聯(lián)素水平均高于非276T攜帶者(G/G型)的血清脂聯(lián)素水平,尤其是突變純合子TT型血清脂聯(lián)素水平增高最顯著。 (6)多因素Logistic回歸分析篩選顯示:Apm-1 276T等位基因、血清脂聯(lián)素水平和HDL是PCOS并發(fā)NAFLD發(fā)病的獨立保護因素;IR指數(shù)、TG、LDL、腰臀比、腰圍是PCOS并發(fā)NAFLD發(fā)病的獨立危險因素;而未發(fā)現(xiàn)Apm-1 45TG基因多態(tài)性與多囊卵巢綜合征并發(fā)非酒精性脂肪性肝病的發(fā)病有關(P0.05)。 結論本研究表明漢族人群中(1) Apm-1 276GT多態(tài)性與PCOS并發(fā)NAFLD的發(fā)生有關,攜帶突變的276T等位基因是發(fā)生PCOS并發(fā)NAFLD的獨立保護因素;未發(fā)現(xiàn)Apm-1 45TG多態(tài)性與PCOS并發(fā)NAFLD的發(fā)病有關。(2) Apm-1 276GT多態(tài)性影響血清脂聯(lián)素的表達,攜帶突變的276T等位基因的個體血清脂聯(lián)素水平高;未發(fā)現(xiàn)Apm-145TG多態(tài)性影響血清脂聯(lián)素的表達。
【圖文】：

素基因 276G>T 位點 PCR 擴增產物瓊脂糖凝膠 (2%)電泳圖2.2 Apm-1SNP45T>G、276G>T 基因 PCR 擴增產物的 RFLP 判定Apm-1SNP45T>G 位點的擴增片段為 372bp，野生型(TT 基因型) 因無 SmaⅠ酶切位點（CGG），酶切后只有與 PCR 產物一樣的 372bp 一個片段,突變雜合子(GT 基因型)有一個酶切位點缺失，酶切后可見372bp、296bp 和 76bp 三個片段，突變純合子(GG 基因型)酶切后可見296bp 和 76bp 兩個片段，其結果見圖 4。196bp—372bp

脂聯(lián)素基因276G>T位點PCR擴增產物瓊
【學位授予單位】：華北煤炭醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R711.75;R575.5

【參考文獻】

相關期刊論文 前7條

1 鐘西琳;陳東風;;脂聯(lián)素的信號轉導通路與非酒精性脂肪性肝病[J];重慶醫(yī)學;2007年15期

2 石勝利;聶玉強;李瑜元;周永健;杜艷蕾;;脂聯(lián)素基因Gly15Gly多態(tài)性與非酒精性脂肪肝病的關系[J];廣州醫(yī)學院學報;2005年06期

3 王遂軍;賈偉平;包玉倩;陸俊茜;方啟晨;陸惠娟;項坤三;;脂聯(lián)素基因多態(tài)性與肥胖、血清脂聯(lián)素水平的相關性[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年07期

4 丁效蕙,趙景民;非酒精性脂肪性肝炎的發(fā)病機制及治療的研究進展[J];世界華人消化雜志;2005年03期

5 石勝利;聶玉強;;脂聯(lián)素與非酒精性脂肪肝病[J];世界華人消化雜志;2007年03期

6 孫偉;姜政;王丕龍;;脂聯(lián)素及其在非酒精性脂肪性肝病中的作用研究進展[J];中華肝臟病雜志;2006年12期

7 Haluk Sargin;Mehmet Sargin;Hülya Gozu;Asuman Orcun;Gülcan Baloglu;Murat Ozisik;Mesut Seker;Oya Uygur-Bayramicli;;Is adiponectin level a predictor of nonalcoholic fatty liver disease in nondiabetic male patients?[J];World Journal of Gastroenterology;2005年37期

，

本文編號：2709819