發(fā)布時間：2020-06-06 16:02

【摘要】：前言 重型肝炎的預后差,病死率高,肝性腦病是嚴重的并發(fā)癥,其中伴有不同程度的腦水腫,可直接導致死亡。但合并腦水腫的發(fā)生機制不很清楚,其中血腦屏障滲透性的增高是主要的表現(xiàn),具體發(fā)生機制有待深入的研究。 實驗材料與方法 重型肝炎組:29例患者臨床死亡后經(jīng)肝組織學檢查證實為重型肝炎。對照組:20例為交通意外死亡者,經(jīng)尸檢確認不存在嚴重的肝組織炎癥。 實驗動物:雄性Balb/c小鼠,6-8周齡,體重18-22g,SPF級,由中國醫(yī)科大學動物中心提供。 實驗方法 腦組織HE染色,光鏡下觀察腦組織病理形態(tài)學變化及腦組織水腫程度分級。電鏡下觀察腦組織BBB的超微結構特點。 重型肝炎患者腦組織TJ蛋白ZO-1免疫組織化學染色。 實驗性Balb/c小鼠急性肝壞死后腦組織TJ蛋白ZO-1免疫組織化學染色、Western blot方法檢測腦組織ZO-1的相對含量和Real Time QRTPCR方法檢測ZO-1 mRNA的相對含量。 TNFα干預后檢測實驗性Bslh/c小鼠急性肝壞死后腦組織上述相同內容的變化。
【圖文】：

上述免疫組織化學染色結果經(jīng)圖象分析系統(tǒng)測得光密度值(OD值)，與正常對照組進行均數(shù)比較后顯示，重型肝炎患者腦組織20一1的陽性顯色減弱，有統(tǒng)計學上的差異(圖1)，P<0.01。Balb/C小鼠腦組織20一1蛋白的免疫組化:NS組中可見到幾乎整張切片上，沿血管EC內膜或胞漿內很強的陽性反應。肝衰竭組中，2小時血管內陽性染色明顯減弱，6和9小時在整張切片上未見到棕褐色染色(照片4A、4B)。圖象分析系統(tǒng)測得光密度值(OD值)，與正常對照組進行均數(shù)比較后顯示，F(xiàn)HF小鼠腦組織20一1的陽性顯色減弱，有統(tǒng)計學上的差異(圖2)

225KDa處有明顯的條帶，在肝衰竭組中，20一1蛋白的表達減弱，h2時為0.77土0.03，在6h和gh時更為明顯(分別為0.54土0.07和0.44土0.06)，各時間點較對照組均有顯著性差異(P<0.01)(圖3)。圖3各組不同時間腦組織20一1蛋白相對含量4.20一1mRNA的表達電泳結果和OD值結果顯示，從組織樣品中提取出的To以NRA純度較好。A260/A280約2.0左右。R械T汕eCPR檢測結果顯示，以構建的NRA作為標準品可以得到較好的擴增曲線、標準曲線和融解曲線，標準曲線相關系數(shù)大于0.98，可以在寬廣的范圍內進行準確定量，擴增效率0.8<e<1.;2融解曲線峰形單一，mT值在87土1之間，說明反應特異性好，陰性對照未檢出，，說明反應體系無污染(圖4A、4B)。RealTimeCPR檢測結果顯示
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R575.3

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本文編號：2699926