【摘要】：目的:探討日本血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)可溶性蛋白(Sj SWP)和重組半胱氨酸蛋白酶抑制劑(r Sjcystatin)對(duì)模擬炎癥性腸病(IBDs)的小鼠結(jié)腸炎及Caco-2細(xì)胞的治療作用及其調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:取24只BALB/c雌鼠分為對(duì)照組、TNBS組、r Sjcystatin組、Sj SWP組,采用2.5%TNBS灌腸誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎模型。在TNBS給藥后腹腔注射50μg日本血吸蟲(chóng)衍生成分。通過(guò)測(cè)量體重減輕量、疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)、結(jié)腸長(zhǎng)度、髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性、宏觀評(píng)分(MAO)和微觀評(píng)分(MIO)來(lái)評(píng)估炎癥參數(shù)和病理。測(cè)定小鼠脾臟中Th1和Th2細(xì)胞的含量,同時(shí)在脾臟中檢測(cè)T調(diào)節(jié)細(xì)胞比例(Tregs),探討血吸蟲(chóng)衍生物誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答。用脂多糖(LPS)刺激巨噬細(xì)胞6小時(shí)產(chǎn)生促炎性巨噬細(xì)胞,然后與腸上皮細(xì)胞共培養(yǎng)建立結(jié)腸炎模型。免疫印跡法檢測(cè)巨噬細(xì)胞分化相關(guān)蛋白,流式細(xì)胞儀檢測(cè)腸上皮細(xì)胞凋亡。ELISA法檢測(cè)結(jié)腸組織和細(xì)胞培養(yǎng)上清中炎性細(xì)胞因子的含量。結(jié)果:血吸蟲(chóng)衍生物干預(yù)后,結(jié)腸炎小鼠的結(jié)腸組織病理及炎癥參數(shù)明顯改善,結(jié)腸組織中細(xì)胞因子IL-4、IL-13、IL-10生成相對(duì)增加,脾臟中的Tregs細(xì)胞由(8.22±3.13)%上升至(18.40±2.06)%(F=8.34,P0.05)。此外,數(shù)據(jù)表明r Sjcystatin對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠的治療作用與Sj SWP相似。在體外實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型中加入r Sjcystatin后,LPS誘導(dǎo)的M1型促炎巨噬細(xì)胞的i NOS蛋白表達(dá)降低,細(xì)胞因子TNF-α的分泌由(126.90±13.81)pg/ml降至(57.15±12.13)pg/ml(F=11.39,P0.01),M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)蛋白Arg-1表達(dá)增加,細(xì)胞因子IL-10由(359.07±59.50)pg/ml升高至(774.46±71.13)pg/ml(F=16.78,P0.01)。共培養(yǎng)的腸上皮細(xì)胞凋亡率由炎癥組的(11.65±0.22)%下降到保護(hù)組的(6.20±0.29)%(F=44.77,P0.001)。結(jié)論:日本血吸蟲(chóng)衍生成分Sj SWP及r Sjcystatin可通過(guò)上調(diào)Tregs和Th2介導(dǎo)的應(yīng)答而減輕小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎,相應(yīng)地抑制導(dǎo)致結(jié)腸炎發(fā)病的Th1免疫應(yīng)答。并可通過(guò)抑制M1型促炎性巨噬細(xì)胞,部分促進(jìn)M1向M2巨噬細(xì)胞分化改善實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型腸上皮細(xì)胞的凋亡。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R574.62

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5 王s

本文編號(hào)：2683993