發(fā)布時間：2020-05-09 21:26

【摘要】：目的通過觀察HCV刺激后小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2細(xì)胞)TLR4表達(dá)變化及其下游細(xì)胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌變化，進(jìn)而分析兩者變化的相關(guān)性，初步探討TLR4是否介導(dǎo)參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)抗HCV固有免疫應(yīng)答及其可能機(jī)制。 方法用含20%HCV陽性血清的培養(yǎng)液刺激BV2細(xì)胞，，為HCV實驗組，并設(shè)置正常血清組和空白對照組。應(yīng)用實時熒光定量PCR(RT-qPCR)方法檢測刺激6h、12h、18h、24h后TLR4mRNA的相對表達(dá)；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別檢測刺激24h后TLR4蛋白及IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12表達(dá)水平；通過觀察TLR4阻斷后各組細(xì)胞IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌變化分析兩者的相關(guān)性。采用單因素方差分析進(jìn)行多組均數(shù)的比較，P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果在BV2細(xì)胞中有TLR4mRNA和TLR4蛋白的表達(dá)；HCV實驗組TLR4mRNA和TLR4蛋白均高于正常血清組及空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)，且HCV實驗組TLR4mRNA表達(dá)24h內(nèi)呈遞增趨勢；HCV實驗組IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明顯高于正常血清組及空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)；HCV實驗組TLR4阻斷后IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)，正常血清組和空白對照組阻斷TLR4前后無明顯變化(P0.05)。 結(jié)論HCV陽性血清刺激可引起體外培養(yǎng)的BV2細(xì)胞TLR4表達(dá)上調(diào)，激活細(xì)胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12等分泌發(fā)揮抗病毒作用，因此TLR4可能介導(dǎo)參與了CNS抗HCV固有免疫應(yīng)答過程。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R512.63

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2656761