【摘要】：背景／目的：近年來非酒精性脂肪肝發(fā)病呈上升趨勢，其發(fā)病機制較為復雜。miR-122在肝臟中高度特異性表達，國內外有研究表明miR-122在丙型病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝、肝細胞癌等肝臟疾病發(fā)生有關，但肝組織miR-122在NAFLD表達水平的研究存在一些爭議，我們推測miR-122可能在NAFLD發(fā)病機制中起到促進作用，本研究對NAFLD患者的miR-122表達水平進行分析。 方法：選取2012年03月-2012年10月四川省人民醫(yī)院肝膽外科和消化內科住院病人，，符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南（2010年修訂版）》，收集41例NAFLD患者，作為病例組，患者簽訂知情同意后進行肝臟病理活檢，又分為NAFL組（10例）和NASH組（31例）；正常對照組為年齡、性別等因素匹配的20名志愿者。并記錄入選者的一般資料和生化代謝指標。Trizol液法提取肝臟組織總RNA和RT-PCR驗證肝臟miR-122的表達差異；miR-122的相對表達水平通過ΔΔCT法進行比較。采用SPSS15.0軟件對病例組和正常組、病例組間的各項檢測結果進行統(tǒng)計分析。 結果：①與正常組比較，患者一般資料中，體重、腰圍、臀圍、BMI、腰臀比、血壓明顯高于正常組（P0.05），其差異有統(tǒng)計學意義；其中體重、腰圍、腰臀比、BMI、收縮壓（p0.001），其差異具有顯著統(tǒng)計學意義。②病例組與正常組比較，AST、ALT、GGT、UA、TC、TG、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR和IAI在兩組間進行比較，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）。兩組間以ALT、TC、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR和IAI變化明顯，其差異有顯著統(tǒng)計學意義（p0.001）。Alb、 TBIL、HDL-C在兩組間進行比較，差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。③NAFL組和NASH組間，一般資料和生化指標比較，體重、腰圍、臀圍、BMI、腰臀比、血壓、AST、ALT、GGT、UA、TC、TG、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR和IAI，差異顯示無統(tǒng)計學意義（P0.05）。④肝組織中miR-122相對表達定量在病例組和正常組之間比較，其差異有顯著統(tǒng)計學意義（P0.001）。NAFL組和NASH組miR-122相對表達量的差異無統(tǒng)計學意義（P=0.2250.05）。⑤分析NAFLD的miR-122診斷價值，采用ROC曲線下面積（AUC值）表示，其AUC值為0.963（95%CI：0.919～1，P＜0.001），敏感性為85.4%，特異性為95.0%。 結論：本實驗發(fā)現(xiàn)NAFLD中肝臟miR-122表達水平明顯升高，提示miR-122在肝臟脂類代謝過程中發(fā)揮重要的調控作用，可能參與NAFLD的病理生理學過程。本實驗進一步拓展我們對NAFLD生物學機制的認識，為今后可能的miR-122靶向治療提供了新方向。
【圖文】：

肝臟總RNA電泳圖

圖 4 擴增曲線 圖 5 標準曲線2.5.2 PCR 特異性分析2.5.2.1 miR-122、U6snRNA 行 PCR 擴增后，觀察其熔解曲線，分析顯示，每條曲線在 Tm 值最高時只有一個高峰，未見多峰，說明 PCR 反應的特異性良好，不存在引物二聚體或其它非特異性擴增產(chǎn)物（圖 6）。
【學位授予單位】：川北醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R575.5

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