【摘要】：目的：應用PCR-DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis,變性梯度凝膠電泳)技術分析腸易激綜合征(irritable bowel syndrome, IBS)患者腸道菌群變化,并系統(tǒng)評價益生菌治療腸易激綜合征的療效。 方法：收集18例IBS患者糞便和腸液標本,10例健康體檢者糞便標本,9例健康體檢者腸液標本,保存至-20℃冰箱。提取糞便細茵總基因組DNA, PCR擴增細菌16S rDNA基因V3可變區(qū),DGGE方法檢測PCR產物。然后對代表條帶進行回收、克隆并測序,將測序結果與GenBank數據庫中的已知序列進行比對,確定細菌種類。另外,計算機檢索PubMed、Cochrane Library、Web Of Sicence、EMbase、MD Consult、相關期刊論文(CNKI)、中國生物醫(yī)學文獻光盤數據庫(CBM)、萬方數據庫中關于益生菌與安慰劑對照治療IBS的隨機對照試驗。文獻檢索時限均為建庫到2011年6月。由兩名研究者按照Cochrane Handbook5.0.2標準獨立評價文獻質量、資料提取并交叉核對,使用RevMan5.1軟件進行Meta分析,并采用GRADE系統(tǒng)進行證據質量評價。 結果：全部樣本DGGE圖譜呈現(xiàn)出復雜的菌群多樣性,IBS患者腸道菌群結構具有明顯特征,與健康體檢者存在明顯差異。共納入20個隨機對照試驗,包括1713例患者。益生菌治療IBS對改善總體癥狀、腹痛／腹部不適、腹脹方面與安慰劑相比,其差異均有統(tǒng)計學意義[SMD (95%CI)分別為-0.18(-0.28,-0.09)、-0.11(-0.21,-0.02)、-0.11(-0.28,-0.09)]�；谙到y(tǒng)評價結果,采用GRADE系統(tǒng)推薦分級方法評價證據質量及推薦等級,結果顯示,證據水平均為低級,然而綜合利弊,推薦強度仍為強推薦(1)。 結論：IBS患者腸道菌群結構發(fā)生改變。現(xiàn)有證據表明,益生菌對改善IBS癥狀有一定療效。由于納入研究方法學質量不均,及各研究間診斷標準、評價方法、劑量、療程等諸多方面存在的差異,需更多設計嚴格的高質量RCT研究進一步證實。
【圖文】：

圖1-2腸液標本細菌DNA 16S rDNA f增電i永圖M:Trans2k Plus DNA Marker; 1?9，11?24:f 增片段;CK:空白對照DGGE條帶序列分析

圖1-2腸液標本細菌DNA 16S rDNA f增電i永圖M:Trans2k Plus DNA Marker; 1?9，11?24:f 增片段;CK:空白對照DGGE條帶序列分析
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R574

【參考文獻】

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1 朱麗明;柯美云;周麗雅;袁耀宗;羅金燕;候曉華;陳e，

本文編號：2607301