【摘要】：研究背景 潰瘍病是臨床上的常見病、多發(fā)病，病程反復(fù)，復(fù)發(fā)率高。目前對于消化性潰瘍的治療，應(yīng)用常規(guī)的抑酸，保護(hù)胃黏膜和抗幽門螺桿菌等治療后，仍有一部分病人消化性潰瘍不能治愈。其原因除了潰瘍本身、幽門螺桿菌感染、吸煙、心理因素等外，某些生長因子減少或者缺乏也成為潰瘍難以治愈的原因之一。三葉因子家族(trefoil factor family，TFF)是一類對胃腸粘膜有保護(hù)作用的因子。TFF2是TFF中唯一的具有兩個三葉草型結(jié)構(gòu)域(P—結(jié)構(gòu)域)和糖基化的小分子蛋白質(zhì)，且集中分布在消化性潰瘍好發(fā)的胃竇和十二指腸。正常情況下，TFF2由胃體和胃竇的胃腺上皮黏液頸細(xì)胞合成與分泌，，分泌量較少。在粘膜損傷后TFF2分泌增加，在消化性潰瘍中有特異性表達(dá)，提示其在維持胃腸道黏膜的完整性和促進(jìn)快速修復(fù)過程中起重要作用。近年研究提示，TFF2與消化性潰瘍的關(guān)系密切，已有大量的體內(nèi)、體外實驗證實TFF2對胃腸道有上皮保護(hù)和促進(jìn)破損黏膜愈合的功能。TFF2能與粘蛋白結(jié)合，減少H~+滲透及有害物質(zhì)對粘膜的損傷，并促進(jìn)上皮細(xì)胞遷移，參與損傷后胃粘膜上皮層的重建，以往研究已經(jīng)證實了直接注射裸露的質(zhì)粒到大鼠的骨骼肌可以獲得有效的基因表達(dá)，如學(xué)者們分別研究了單次局部注射含有VEGF和PDGF的質(zhì)粒對實驗性大鼠胃潰瘍和十二指腸潰瘍，裸露基因治療取得了預(yù)期的效果，但是國內(nèi)外尚無應(yīng)用TFF2進(jìn)行類似治療的報道，我們通過基因拼接方法合成hTFF2基因，并構(gòu)建hTFF2基因的真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)-hTFF2，并應(yīng)用編碼有hTFF2基因的裸質(zhì)粒對實驗性
【圖文】：

研究表明某些生長因子的缺乏或者減少是潰瘍難以治2(Treofliafcto:2，TFF2)在生理條件時能保持胃豁膜時分泌增多，在消化性潰瘍中有特異表達(dá)，提示其在和促進(jìn)快速修復(fù)過程中起重要作用，在消化性潰瘍的[26]。本文應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymeraseehainreaetio因拼裝技術(shù)合成hTFFZ，并進(jìn)行hTFFZ基因的真核表方法peDNA3.(l+)為南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院消化病研究所)pGM一Teasy試劑盒購自promega公司(質(zhì)粒圖譜如圖1.

圖1.2pGM一TEays質(zhì)粒圖譜Fiuger1.2SturetuerofrPGM一TEasy與試劑酶、PRc凝膠回收試驗盒和限制性內(nèi)切酶為Takara公司產(chǎn)品。寡核昔酸和PCR引物片段均由上海博亞生物有限公司合成。一Taeys試劑及質(zhì)粒大量提取試劑盒購自Pormgea公司。n隊ladder，M砍e:111，pufPeRMastermix購自北京天為時代用瓊脂糖:AMRESCO進(jìn)口分裝。法1TFFZ基因引物的設(shè)計FZ基因拼裝引物設(shè)計以GENBANK中已知人的嚇F2基因的蛋:
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R573.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2599790