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NRAGE對(duì)腸上皮細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-04 17:08

  本文選題:NRAGE + 缺血再灌注損傷 ; 參考:《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年04期


【摘要】:目的探討神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否參與腸缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)損傷的過(guò)程及其對(duì)腸上皮細(xì)胞凋亡及occludin蛋白的影響。方法制備SD大鼠小腸I/R損傷模型,取腸組織行免疫組化染色,觀察NRAGE蛋白的表達(dá)變化;體外腸上皮永生化細(xì)胞株IEC-6給予缺氧及復(fù)氧后觀察細(xì)胞NRAGE的表達(dá)變化;將NRAGE過(guò)表達(dá)慢病毒(Lv-NRAGE組)、NRAGE干擾表達(dá)慢病毒(sh-NRAGE組)及對(duì)照慢病毒(Lv-control組)感染IEC-6細(xì)胞,并設(shè)置不加慢病毒的對(duì)照組(NC組),Western blot及RT-PCR觀察各組細(xì)胞NRAGE蛋白及mRNA的表達(dá)變化,流式細(xì)胞術(shù)觀察各組IEC-6細(xì)胞的凋亡情況,Western blot觀察感染慢病毒后緊密連接蛋白o(hù)ccludin蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果 I/R損傷后腸黏膜上皮細(xì)胞NRAGE表達(dá)較sham組升高(P0.01);體外IEC-6細(xì)胞缺氧6h后NRAGE蛋白的表達(dá)增加(P0.01),NRAGE mRNA表達(dá)升高(P0.01)。感染慢病毒48h后,相比于Lvcontrol組,Lv-NRAGE組早期凋亡率增加(P0.01),occludin蛋白表達(dá)降低(P0.01),sh-NRAGE組早期凋亡率降低(P0.01),occludin蛋白表達(dá)增高(P0.001)。結(jié)論 NRAGE參與了I/R損傷過(guò)程,并促進(jìn)腸上皮細(xì)胞凋亡,降低occludin蛋白的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the role of nerve growth factor receptor (NGF) receptor in the pathogenesis of neurotrophin receptor-interacting mage homologue gene (NRAGE) involved in the injury of (ischemia and reperfusionI / R and the effect of NGF receptor on apoptosis of intestinal epithelial cells and occludin protein. Methods the intestinal I / R injury model of SD rats was established, and the expression of NRAGE protein was observed by immunohistochemical staining in intestinal tissues of SD rats, and the changes of NRAGE expression in intestinal epithelial immortalized cell line IEC-6 were observed after hypoxia and reoxygenation in vitro. NRAGE overexpression lentivirus (Lv-NRAGE group) and control lentivirus (Lv-NRAGE group) were infected with IEC-6 cells. The expression of NRAGE protein and mRNA was observed by Western blot and RT-PCR in the control group (NC group). Apoptosis of IEC-6 cells in each group was observed by flow cytometry and the expression of tight junction protein (occludin) was observed by Western blot after infection with lentivirus. Results after I / R injury, the expression of NRAGE in intestinal mucosal epithelial cells was higher than that in sham group (P0.01), and the expression of NRAGE protein in IEC-6 cells was increased (P0.01) after hypoxia for 6 h (P0.01). 48 hours after infection with lentivirus, the early apoptosis rate of Lv-NRAGE group increased compared with that of Lvcontrol group (P0.01). The expression of cludin protein decreased (P0.01) in sh-NRAGE group (P0.01) and the expression of cludin protein increased (P0.001) in sh-NRAGE group. Conclusion NRAGE is involved in the process of I / R injury, promotes the apoptosis of intestinal epithelial cells and reduces the expression of occludin protein.
【作者單位】: 重慶市第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院普通外科;北京海軍總醫(yī)院普通外科;河南省信陽(yáng)市明港鎮(zhèn)897醫(yī)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.81370479)資助
【分類號(hào)】:R574

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本文編號(hào):2096771

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