丙型肝炎病毒F蛋白上調(diào)人外周血單個核細(xì)胞IL-13的表達(dá)
本文選題:肝炎 + 丙型; 參考:《中華疾病控制雜志》2015年02期
【摘要】:目的探討丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白對白介素13(interluekin-13,IL-13)表達(dá)的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法收集慢性HCV1b型患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血樣,檢測F抗體(F antibody,FAb)的陽性率并分成2組(F-Ab(+)CHP、F-Ab(-)CHP);收集健康者血樣作為對照組;用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測各組樣本血清中IL-13的水平;分離患者外周血單個核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用不同濃度的F蛋白刺激72 h后,ELISA法檢測細(xì)胞上清中IL-13的水平,蛋白質(zhì)免疫印跡(western blotting)法檢測細(xì)胞中GATA結(jié)合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA-3)和活化T細(xì)胞核因子(nuclear factor of activated T cell,NFAT1)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 F-Ab(+)CHP組血清IL-13水平高于F-Ab(-)CHP組(P0.001);PBMC經(jīng)F蛋白體外刺激后,細(xì)胞上清中IL-13水平隨著F蛋白刺激濃度的增高而增高(x2=13.52,P=0.009);PBMC中GATA-3蛋白表達(dá)水平不受F蛋白刺激的影響(均有P0.05),而F蛋白可下調(diào)NFAT1蛋白表達(dá)。結(jié)論在體外培養(yǎng)的PBMC中,F蛋白有上調(diào)IL-13水平的作用,而且可能通過下調(diào)NFAT1間接發(fā)揮作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hepatitis C virus hepatitis C virus (HCV) on the expression of interleukin 13 interluekin-13 (IL-13) and its related mechanism. Methods Blood samples of patients with chronic HCV1b type were collected and the positive rate of F antibody F antibody FAbwas detected and divided into 2 groups. The blood samples of healthy subjects were collected as control group, and the serum IL-13 level of each group was detected by enzyme linked immunosorbent assayelia Elisa (enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated from patients with peripheral blood mononuclear cells (PBMC). After 72 h stimulation with different concentrations of F protein, the level of IL-13 in the supernatant was detected by Elisa. Western blotting assay was used to detect the expression of GATA binding protein 3(GATA binding protein 3 (GATA-3) and activated T cell nuclear factor of activated T cell type 1 (NFAT1). Results the level of serum IL-13 in F-AbP group was higher than that in F-Ab(-)CHP group. The level of IL-13 in the supernatant was increased with the increase of the concentration of F protein. The expression of GATA-3 protein was not affected by the stimulation of F protein (P 0.05), but F protein could down-regulate the expression of NFAT1 protein. Conclusion in PBMC cultured in vitro, F protein can up-regulate the level of IL-13, and may play an indirect role by down-regulating NFAT1.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;昆明醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;南京軍區(qū)疾病預(yù)防控制中心疾病預(yù)防控制所;中國藥科大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;解放軍第113醫(yī)院;宜興市人民醫(yī)院檢驗科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81172724;30972628) 十二五國家科技重大專項(2011ZX10004-902) 江蘇省自然科學(xué)基金面上項目(BK2010112;BK2011840)
【分類號】:R512.63
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級參考文獻(xiàn)】
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本文編號:1807915
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