氯喹對體外活化肝星狀細(xì)胞自噬與膠原代謝的影響
發(fā)布時間:2018-04-23 23:15
本文選題:自噬 + 氯喹。 參考:《中國病理生理雜志》2017年09期
【摘要】:目的:研究不同濃度的自噬抑制劑氯喹(CQ)對活化的大鼠肝星狀細(xì)胞系HSC-T6中Ⅰ、Ⅲ型膠原表達的影響及可能機制。方法:應(yīng)用轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)活化HSC-T6細(xì)胞,給予CQ干預(yù)24 h。實驗分組為:control組、TGF-β1組、TGF-β1+CQ(15μmol/L)組、TGF-β1+CQ(30μmol/L)組和TGF-β1+CQ(60μmol/L)組。采用Western blot技術(shù)檢測微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)比值LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬靶蛋白P62、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)、金屬蛋白酶組織抑制物1(TIMP-1)和TIMP-2的表達情況;免疫細(xì)胞化學(xué)檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原的表達;RT-q PCR檢測Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、MMP-13、TIMP-1和TIMP-2mRNA的表達變化。結(jié)果:CQ干預(yù)后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明顯升高且呈劑量依賴性;P62蛋白表達TGF-β1+CQ組均顯著高于TGF-β1組(P0.01)。TGF-β1組的Ⅰ、Ⅲ型膠原表達量較control組顯著增加,TGF-β1+CQ組較TGF-β1組也有明顯增加。α-SMA的表達在TGF-β1組和TGF-β1+CQ組均顯著高于control組(P0.05),而TGF-β1組和TGF-β1+CQ各組之間無顯著差異。MMP-13表達在TGF-β1+CQ組較TGF-β1組顯著下降(P0.05);TIMP-1和TIMP-2在TGF-β1+CQ組較TGF-β1組顯著升高(P0.05),且呈劑量依賴性。結(jié)論:自噬抑制劑CQ能顯著增加HSC-T6細(xì)胞中Ⅰ、Ⅲ型膠原的表達并呈劑量依賴性,這可能與其上調(diào)TIMP-1及TIMP-2的表達并抑制MMP-13表達有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of different concentrations of chloroquine on the expression of type 鈪,
本文編號:1794072
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