本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇對脂多糖攻擊大鼠血液流變性的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北北方學院》 2015年

白藜蘆醇對脂多糖攻擊大鼠血液流變性的作用

王瑩  

【摘要】：急性腹膜炎引起的膿毒癥是臨床常見的危重病理過程。在其發(fā)展過程中出現(xiàn)的頑固性低血壓、廣泛微血栓、血流動力學異常、微循環(huán)障礙,成為器官功能障礙或結(jié)構(gòu)損傷、導致患者死亡的重要原因。眾多研究表明,白藜蘆醇(resveratrol,Res)預(yù)處理或后給藥均可不同程度上減輕盲腸結(jié)扎穿刺術(shù)(cecal ligation and puncture,CLP)、靜脈輸入大腸桿菌混懸液、靜脈輸入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、腹腔注射LPS、氣道滴注LPS等因素導致內(nèi)毒素休克或膿毒癥動物的器官損傷程度,其作用機制涉及降低炎癥反應(yīng)、減輕氧化應(yīng)激等多種因素,但詳細的機制還需要進一步深入研究。血液流變性異常在內(nèi)毒素休克引起器官損傷的過程中具有重要的推動作用,但白藜蘆醇對腹腔感染引起膿毒癥過程中的血液流變性異常有無改善作用,尚未報道。為此,本研究以腹腔注射LPS的方法建立了LPS攻擊大鼠模型,進一步觀察白藜蘆醇對LPS攻擊大鼠血液流變性的作用。24只清潔級Wistar雄性大鼠隨機均分為假手術(shù)組(Sham)、假手術(shù)組+Res(Sham+Res)、LPS組、LPS+Res組,每組6只。所有動物在清醒狀態(tài)下,按下述方法分別進行處理:LPS組與LPS+Res組大鼠腹腔注射LPS(8 mg/kg),同時,Sham組與Sham+Res組大鼠腹腔注射等量生理鹽水;LPS注射后1 h,Sham+Res組與LPS+Res組大鼠接受Res肌肉注射(30 mg/kg),作為對照,Sham組與LPS組注射二甲基亞砜(dimethylsulfoxide,DMSO,100μl/kg)。在注射Res或DMSO 4.5 h后,所有大鼠用1%戊巴比妥鈉進行全身麻醉(50 mg/kg);進行股部手術(shù),分離股動脈,連接生物信號采集系統(tǒng)監(jiān)測平均動脈血壓(mean arterial pressure,MAP),記錄穩(wěn)定10 min后的MAP;然后行腹部手術(shù),應(yīng)用激光散斑血流監(jiān)測視頻系統(tǒng)檢測肝、胃、脾、腸、腎等器官的血流灌注量;然后進行頸部手術(shù),分離頸總動脈,插管,留取全血標本;將0.1 ml全血放入含有EDTA·K2干粉的EP管,應(yīng)用全自動血球計數(shù)儀檢測各紅細胞參數(shù),包括:紅細胞數(shù)量(redbloodcellcounts,rbc)、血紅蛋白(hemoglobin,hb)、紅細胞比積(hematocrit,hct)、平均紅細胞容積(meancorpuscularvolume,mcv)、平均紅細胞血紅蛋白含量(meancorpuscularhemoglobin,mch)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(meancorpuscular-hemoglobinconcentration,mchc)、紅細胞分布寬度(redbloodcelldistributionwidth,rdw);同時,記錄白細胞參數(shù)與血小板參數(shù)包括:白細胞數(shù)量(whitebloodcellcounts,rbc)、中性粒細胞百比數(shù)(percentageofneutrophil)、淋巴細胞百分比(percentageoflymphocyte)、中性粒細胞絕對值、淋巴細胞絕對值、血小板數(shù)(plateletcounts,plt)、血小板比積(plateletocrit,pct)、平均血小板體積(meanplateletvolume,mpv)、血小板分布寬度(plateletdistributionwidth,pdw)、大血小板比例(platelet-largecellratio,p-lcr);留取3.0ml左右的全血標本至肝素抗凝管,應(yīng)用血液流變儀檢測血液黏度;血液標本留畢后,迅速留取固定位置的心肌、肝、腎、肺組織,部分標本冷凍于-80℃冰箱,用于制備組織勻漿,應(yīng)用過氧化氫酶法檢測髓過氧化物酶(myeloperoxidase,mpo)活性,應(yīng)用elisa方法檢測l-選擇素(l-selectin)、p-選擇素(p-selectin)、細胞間黏附分子(intercelluarcelladhesionmolecule,icam)-1、可溶性血小板內(nèi)皮細胞黏附分子(solubleplatelet-endothelialcelladhesionmolecule1,specam-1)等黏附分子的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),lps腹腔注射6h后,大鼠map、低切與中切全血黏度、脾與腎的器官局部血流量顯著降低,但紅細胞各參數(shù)、全血低切與高切相對黏度未出現(xiàn)明顯變化;白藜蘆醇干預(yù)顯著提高了mch,進一步降低了全血低切、中切、高切黏度以及全血高切相對黏度、胃區(qū)血流量,但沒有提高lps攻擊后大鼠的map;四組間的血漿黏度、肝、脾、腸血流量未見統(tǒng)計學差異。同時,結(jié)果顯示,lps腹腔注射引起了外周血血小板數(shù)量與血小板比積、白細胞數(shù)量與中性粒細胞、淋巴細胞的絕對值顯著減少;白藜蘆醇干預(yù)顯著提高了白細胞數(shù)量與淋巴細胞絕對值,降低了淋巴細胞百分比。進一步發(fā)現(xiàn),腹腔注射lps降低了肺組織icam-1水平、提高了腎組織ICAM-1含量,白藜蘆醇干預(yù)提高了肺組織L-選擇素與ICAM-1水平;四組間肺、腎、心肌組織P-選擇素與sPECAM-1含量以及腎、心肌組織L-選擇素、心肌組織ICAM-1水平均未見統(tǒng)計學差異。同時可見,腹腔注射LPS提高了肺組織MPO活性,白藜蘆醇治療降低了MPO活性。上述研究結(jié)果表明,腹腔注射LPS引起大鼠出現(xiàn)了血液流變性異常,表現(xiàn)在全血黏度降低、部分器官血液灌注量減少,白藜蘆醇治療進一步擴展了LPS早期的擬交感作用,使全血黏度降低;腹腔注射LPS導致大鼠外周血白細胞數(shù)量減少,其作用可能與白細胞黏附浸潤于肺組織有關(guān),這是LPS導致肺組織炎癥反應(yīng)的重要因素;白藜蘆醇治療則抑制了白細胞在肺組織的黏附浸潤,這可能是白藜蘆醇降低LPS引起炎癥反應(yīng)的機制之一。白藜蘆醇減輕LPS不良作用的表現(xiàn)與機制,還需要進一步研究。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：河北北方學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R572.2
【目錄】：

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本文編號：177244