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趨化因子CCL20在干眼小鼠眼表細(xì)胞表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-07 01:22

  本文關(guān)鍵詞:趨化因子CCL20在干眼小鼠眼表細(xì)胞表達(dá)研究


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【摘要】:目的:檢測趨化生長因子20(CCL20)在干眼小鼠眼表的表達(dá)及抗CCL20抗體對小鼠干眼的抑制作用,探索CCL20在干眼發(fā)病中的作用。方法:6周齡C57BL/6小鼠18只,隨機(jī)分為對照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組,每組6只。對照組不做任何處理,PBS注射組及CCL20抗體注射組置恒溫恒濕造模室內(nèi),給予雙下肢交替注射氫溴酸東莨菪堿及不間斷吹風(fēng)建立干眼模型,兩組分別隔日結(jié)膜下注射25μlPBS及抗CCL20抗體,第11日收集各組小鼠淚液后處死小鼠并分別采集各組小鼠的角膜和結(jié)膜,通過Real-Time PCR、免疫組化染色、淚液luminex檢測各組小鼠角膜結(jié)膜組織中CCL20和IL-17的表達(dá)。結(jié)果:1.Real-Time PCR檢測對照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠角膜CCL20 mRNA分別為:1.00±0.00、1.45±0.11、0.23±0.04。對照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠結(jié)膜CCL20 mRNA表達(dá)分別為:1.00±0.00、6.38±1.86、0.32±0.14。對照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠角膜IL-17mRNA表達(dá)分別為:1.00±0.00、4.05±0.19、1.67±0.34。對照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠結(jié)膜IL-17 mRNA表達(dá)分別為:1.00±0.00、4.08±1.38、0.74±0.29。干眼PBS注射組小鼠角膜和結(jié)膜的CCL20mRNA、IL-17 mRNA的表達(dá)明顯高于對照組和干眼抗CCL20抗體注射組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干眼抗CCL20抗體注射組小鼠的角膜的CCL20 mRNA、IL-17 mRNA的表達(dá)低于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.CCL20濃度,對照組(50.39±7.65)pg/ml,PBS組(134.45±7.0)pg/ml,抗體組(17.52±5.83)pg/ml,組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。淚液IL-17,正常組(100.9±10.12)pg/ml,PBS組(220.88±19.15)pg/ml,抗體組(64.11±5.56)pg/ml,組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.免疫組化染色(抗CCL20):干眼PBS注射組眼表細(xì)胞中可見棕褐色顆粒,對照組及抗CCL20抗體注射組未見。結(jié)論:CCL20參與了小鼠干眼發(fā)病,給予干眼小鼠結(jié)膜下注射抗CCL20抗體,不僅可以抑制干眼小鼠眼表CCL20的表達(dá),還能抑制干眼炎癥相關(guān)因子IL-17在眼表的表達(dá),甚至可以將干眼小鼠的眼表的CCL20、IL-17表達(dá)降至低于對照組表達(dá)水平?笴CL20抗體對干眼小鼠眼表CCL20表達(dá)的抑制效應(yīng)可能強(qiáng)于對IL-17的表達(dá)抑制。
【關(guān)鍵詞】:干眼 趨化因子 CCL20 IL-17
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R777.34
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 前言10-12
  • 材料與方法12-20
  • 1. 實(shí)驗(yàn)材料12-14
  • 2. 實(shí)驗(yàn)方法14-19
  • 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法19-20
  • 結(jié)果20-24
  • 1.Real-Time PCR檢測眼表CCL20、IL-17 mRNA的表達(dá)情況20-21
  • 2.淚液中CCL20、IL-17細(xì)胞因子結(jié)果21-22
  • 3.角膜熒光素鈉染色結(jié)果22-23
  • 4.眼表免疫組化染色23-24
  • 分析與討論24-27
  • 結(jié)論27-28
  • 參考文獻(xiàn)28-32
  • 綜述 Th 細(xì)胞及其相關(guān)因子參與干眼發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展32-41
  • 參考文獻(xiàn)38-41
  • 在學(xué)期間承擔(dān)的科研課題與研究成果41-42
  • 致謝42-43
  • 個(gè)人簡歷43

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2 葉曉芳;洪佳旭;牟U,

本文編號(hào):986130


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