S100A4真核表達(dá)載體構(gòu)建及對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響
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更多相關(guān)文章: 鼻咽腫瘤 SA 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 基質(zhì)金屬酶蛋白 侵襲轉(zhuǎn)移
【摘要】:目的構(gòu)建S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的鼻咽癌細(xì)胞株,研究S100A4與鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系。方法 PCR方法擴(kuò)增S100A4片段,將產(chǎn)物插入p CMV載體,將重組質(zhì)粒及其空白質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到鼻咽癌細(xì)胞CNE2;MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,Western blot檢測(cè)S100A4、E-cadherin、Fibronectin、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá);Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力變化。結(jié)果成功構(gòu)建了S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的重組細(xì)胞株;細(xì)胞生長(zhǎng)曲線表明S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的重組細(xì)胞株生長(zhǎng)較快;S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的重組細(xì)胞株中E-cadherin、Fibronectin低表達(dá)而MMP2、MMP9高表達(dá);Transwell實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)S100A4穩(wěn)定高表達(dá)的重組細(xì)胞株的侵襲細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于空白載體轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組(P0.01)。結(jié)論 S100A4能調(diào)控鼻咽癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)過(guò)程,并上調(diào)MMP2、MMP9表達(dá)而促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。
【作者單位】: 南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻喉科;
【關(guān)鍵詞】: 鼻咽腫瘤 SA 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 基質(zhì)金屬酶蛋白 侵襲轉(zhuǎn)移
【基金】:湖南省科技廳資助項(xiàng)目(No:2012SK3159)
【分類號(hào)】:R739.63
【正文快照】: 鼻咽癌(nasophargngenl carcinoma,NPC)發(fā)病具有地域特點(diǎn),我國(guó)南方地區(qū)是鼻咽癌的高發(fā)區(qū)域,其發(fā)病部位比較隱蔽,容易早期發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移。臨床上鼻咽癌患者化療和放療治療效果均不理想,其5年生存率約50%[1]。鼻咽癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟的復(fù)雜過(guò)程,其分子機(jī)制包括腫瘤細(xì)胞接
【相似文獻(xiàn)】
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4 黃s
本文編號(hào):660327
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