本文關(guān)鍵詞：利用細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)研究鬼針草調(diào)控干眼癥免疫性炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的：本研究利用細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)檢測(cè),結(jié)合眼表角結(jié)膜組織超微結(jié)構(gòu)和炎癥因子及凋亡基因檢測(cè),明確鬼針草通過哪些關(guān)鍵細(xì)胞因子調(diào)控治療干眼癥的炎癥和凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,從分子水平探討鬼針草治療干眼癥的機(jī)制。研究?jī)?nèi)容：①建立兩種類型大鼠干眼癥模型：應(yīng)用阿托品眼液抑制淚液分泌制作淚液分泌缺乏型干眼模型,燒灼封閉瞼板腺口制作淚液蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼模型。②大鼠造模前后,鬼針草治療前后檢測(cè)淚液和淚膜變化及結(jié)膜和淚腺組織超微結(jié)構(gòu)變化。③采用免疫組化(SP法)觀察造模前后、鬼針草治療前后結(jié)膜和淚腺組織炎癥因子(IL-1、TNF-α)及凋亡基因(bcl-2, Bax)的表達(dá)。④應(yīng)用細(xì)胞因子抗體芯片(RayBioTM細(xì)胞因子芯片),分別對(duì)兩種類型干眼癥中鬼針草治療組和生理鹽水對(duì)照組的大鼠淚液中有表達(dá)細(xì)胞因子進(jìn)行差異分析,推導(dǎo)鬼針草通過哪些因子參與免疫炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),從分子水平闡明鬼針草多靶點(diǎn)治療干眼癥的的機(jī)制。研究結(jié)果：從統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義上來看,用阿托品眼液大鼠干眼癥模型在應(yīng)用其進(jìn)行使用的之前和之后從淚液的整體流量上來看并沒有明顯的差異(P0.05),而這差異主要反映在淚膜的具體破裂的時(shí)間的不同(P0.01)；并通過對(duì)比上皮細(xì)胞當(dāng)中存在的TNF-α以及Fas等可以看出明顯的變化,特別是Fas已經(jīng)明顯少了很多陽(yáng)性,而且存在非常大的不同(P0.01),IL也相對(duì)少了很多,而且存在非常大的不同(P0.05)。②從統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義上來看,封閉瞼板腺大鼠干眼癥模型組治療前后淚液流量的對(duì)比(P0.05),而這差異反映在淚膜的具體破裂的時(shí)間方面沒有太大的差別(P0.05)。封閉條件下的瞼板腺大鼠干眼這種癥狀的情況來看,對(duì)比其前后并沒有明顯的不一樣(P0.05)。經(jīng)細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)定量檢測(cè),兩組干眼癥模型的淚液中MMP-8、IL-1 beta、IL-4、 IL-10、Fas Ligand、CINC-3、CNTF這7中細(xì)胞因子表達(dá)有差異,P0.05。而鬼針草治療后,阿托品干眼癥模型組中,Fas Ligand、IL-1 beta、IL-4、IL-10、CINC-3、CNTF較治療前有差異性表達(dá),P0.05,其中Fas Ligand與CNTF表達(dá)差異性顯著,P0.01；封閉瞼板腺口干眼癥模型組中,僅有IL-1 beta表達(dá)有顯著性下降,P0.05。研究結(jié)論：針對(duì)干眼癥方面的治療來說,鬼針草是有一定條件限制的,其對(duì)于封閉瞼板腺口這種情況并不能產(chǎn)生作用。目前僅適用與阿托品滴眼的性狀。鬼針草通過IL-1 beta、IL-4、 IL-10、CINC-3、CNTF差異表達(dá)轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào),可以明顯改善由以上細(xì)胞因子介導(dǎo)的阿托品點(diǎn)眼形成的淚液分泌缺乏型干眼癥,而對(duì)封閉瞼板腺口形成的蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥,只對(duì)IL-1beta的影響,治療效果不明顯。因此認(rèn)為,鬼針草通過IL-1 beta、IL-4、IL-10、CINC-3、 CNTF、Fas Ligand細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)導(dǎo),發(fā)揮治療干眼癥的作用,其中阿托品組中Fas Ligand引導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路作用大于炎癥因子信號(hào)通道；封閉瞼板腺組淚腺組織中IL-1 beta信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)起主要作用。
【關(guān)鍵詞】：干眼癥 鬼針草 細(xì)胞凋亡 炎癥因子 細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R777.34
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 第一部分 前言與理論研究11-17
• 1. 立項(xiàng)依據(jù)11-13
• 2. 理論研究13-15
• 2.1 祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)干眼癥的認(rèn)識(shí)13
• 2.2 鬼針草的相關(guān)研究13-14
• 2.3 干眼癥的治療現(xiàn)狀14-15
• 3. 細(xì)胞凋亡和炎癥因子15
• 4. 細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)15-17
• 第二部分 干眼癥動(dòng)物模型的建立及角結(jié)膜和淚腺組織超微結(jié)構(gòu)變化17-21
• 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>17
• 二、材料與方法17-18
• 1. 淚液分泌缺乏型干眼模型17-18
• 2. 封閉瞼板腺口干眼兔模型的建立18
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-21
• 1. 阿托品凝膠點(diǎn)眼干眼模型18
• 2. 封閉瞼板腺口模型18-21
• 第三部分 干眼結(jié)膜及淚腺組織中細(xì)胞凋亡和炎癥因子的觀察21-29
• 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>21
• 二、材料與方法21-25
• 1. 材料21
• 2. 主要科研設(shè)備、儀器及試劑21
• 3. 檢測(cè)方法21-25
• 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法25
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-29
• 1. 阿托品眼液干眼癥模型組25-26
• 2. 封閉瞼板腺口干眼癥模型26-27
• 3. 細(xì)胞因子抗體芯片檢測(cè)27-29
• 第四部分 鬼針草治療干眼癥模型的療效觀察29-33
• 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>29
• 二、材料與方法29
• 1. 分組與材料29
• 2. 主要藥物配比29
• 3. 主要實(shí)驗(yàn)材料及儀器同上一部分29
• 4. 實(shí)驗(yàn)方法29
• 5. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理29
• 三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-33
• 1. 淚流量及BUT檢查29-30
• 2. 促凋亡因子與炎癥因子30-31
• 3. 細(xì)胞因子芯片抗體檢測(cè)31-33
• 第五部分 討論33-37
• 1. 結(jié)果分析33
• 2. 細(xì)胞凋亡與炎癥因子33-34
• 3. 細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)34-37
• 附錄37-38
• 參考文獻(xiàn)38-40
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果40-41
• 致謝41

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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本文編號(hào)：495781