急性高眼壓對(duì)大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能及泵功能的影響
本文關(guān)鍵詞:急性高眼壓對(duì)大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能及泵功能的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:角膜內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)于維持角膜的相對(duì)脫水狀態(tài)起著非常重要的作用,急性閉角型青光眼患者角膜水腫明顯,本研究主要探討急性高眼壓(acute ocular hypertension,AOH)對(duì)大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞的影響。方法:將Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為四組,穿刺對(duì)照組、AOH后即刻組、AOH后2天組、AOH后7天組。SD大鼠右眼前房灌注平衡鹽液(balance salt solution,BSS)2小時(shí)建立急性高眼壓模型,左眼作為正常對(duì)照。在前房灌注期間和灌注后,用手持式非接觸眼壓計(jì)測(cè)量大鼠眼壓,裂隙燈顯微鏡觀察各組角膜水腫情況。茜素紅染色觀察角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),Ki67染色觀察角膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖情況,通過(guò)檢測(cè)FITC-dextran在角膜基質(zhì)中的累積量來(lái)評(píng)價(jià)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的滲透。通過(guò)免疫熒光染色法和Westernblot檢測(cè)角膜內(nèi)皮細(xì)胞頂端連接復(fù)合體(ZO-1、F-actin)和Na,KATPase的改變,評(píng)價(jià)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的屏障功能和泵功能。結(jié)果:前房灌注期間眼壓為82.6±2.3mmHg(正常大鼠眼壓范圍為:10.2±0.4 mmHg)。與對(duì)照組相比,AOH后即刻組角膜出現(xiàn)明顯水腫,熒光滲透明顯增加,周邊角膜內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量明顯減少且細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,緊密連接蛋白(ZO-1)和細(xì)胞骨架(F-actin)均被明顯破壞。Na,K-ATPase也被破壞,但表達(dá)輕微增加,沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AOH后2天組角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖明顯,角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度恢復(fù)至正常,F-actin被破壞得更明顯,角膜水腫、周邊角膜內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量、熒光滲透,ZO-1和Na,K-ATPase均恢復(fù)正常。AOH后7天組除了F-actin尚未完全修復(fù)外角膜內(nèi)皮細(xì)胞的其余各項(xiàng)指標(biāo)均恢復(fù)正常。結(jié)論:AOH 2小時(shí)可以破壞大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞的屏障功能及泵功能,是急性閉角型青光眼引起角膜水腫的原因。
【關(guān)鍵詞】:急性高眼壓 角膜內(nèi)皮細(xì)胞 屏障功能 泵功能
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R775
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- 第1章 緒論10-14
- 第2章 材料與方法14-22
- 2.1 材料與設(shè)備14-16
- 2.2 構(gòu)建大鼠急性高眼壓模型16-17
- 2.3 實(shí)驗(yàn)方法17-20
- 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-22
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-30
- 3.1 大鼠急性高眼壓模型眼壓變化曲線22
- 3.2 裂隙燈顯微鏡檢查22-23
- 3.3 角膜內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)及茜素紅染色23-24
- 3.4 急性高眼壓損傷誘導(dǎo)大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞增殖24-25
- 3.5 AOH破壞角膜內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白(ZO-1)的完整性25-26
- 3.6 AOH破壞角膜內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞骨架蛋白(F-actin)26-27
- 3.7 AOH破壞角膜內(nèi)皮細(xì)胞的泵結(jié)構(gòu)蛋白(Na,K-ATPase)27-28
- 3.8 AOH導(dǎo)致角膜內(nèi)皮細(xì)胞的滲透性增加28-30
- 第4章 討論30-34
- 第5章 結(jié)論34-36
- 參考文獻(xiàn)36-42
- 附錄 1. 縮略詞索引42-44
- 附錄 2. 綜述44-54
- 參考文獻(xiàn)50-54
- 附錄 3. 碩士期間相關(guān)成果目錄54-56
- 一、碩士期間文章發(fā)表情況54
- 二、碩士期間參加的重要學(xué)術(shù)會(huì)議54-56
- 致謝56-57
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