目的:在體外實(shí)驗(yàn)中探明二甲雙胍對(duì)順鉑耳毒性的保護(hù)作用,并從SIRT3-自噬信號(hào)的角度初步探明其可能的產(chǎn)生機(jī)制。方法:1、首先在HEI-OC1細(xì)胞中建立順鉑耳毒性的細(xì)胞模型。分組為對(duì)照組(C組)、順鉑組(CP組)、二甲雙胍組(M組)、順鉑+二甲雙胍組(CPM組)這四組。CP組給予順鉑處理24小時(shí),CPM組在給予順鉑處理前給予二甲雙胍預(yù)處理24h,M組僅給予二甲雙胍作用24小時(shí),C組不做處理,于造模終點(diǎn)收集細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。提取細(xì)胞總蛋白應(yīng)用Western Blot技術(shù)檢測(cè)組間SIRT3蛋白表達(dá)水平的差異,采用PCR技術(shù)檢測(cè)組間SIRT3 mRNA水平上的差異。用Western Blot和免疫熒光技術(shù)通過(guò)對(duì)組間自噬相關(guān)蛋白LC3II和P62的蛋白表達(dá)水平差異的檢測(cè),探明順鉑及二甲雙胍對(duì)自噬的影響。我們進(jìn)一步用流式細(xì)胞技術(shù)(FITC/PI檢測(cè)法)來(lái)檢測(cè)組間細(xì)胞的凋亡比例的差異。2、我們進(jìn)一步應(yīng)用干擾SIRT3的慢病毒轉(zhuǎn)染HEI-OC1細(xì)胞,建立干擾SIRT3的細(xì)胞模型,并分為:對(duì)照組(C組)、順鉑組(CP組)、二甲雙胍組(M組)、順鉑+二甲雙胍組(CPM組)、干擾SIRT3組(sh-lv-S...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
材料和方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
綜述 順鉑耳中毒損傷與自噬：現(xiàn)狀與展望
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3976174