目的糖尿病性角膜病變(Diabetic Keratopathy,DK)是常見的糖尿病眼部并發(fā)癥,其發(fā)病機制尚未完全明確,臨床尚無有效的手術(shù)或藥物等干預措施。因此,研究DK新的疾病機制、新的治療靶標和有效防治措施具有重要的臨床意義。本研究將探討鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)誘導的Ⅰ型糖尿病模型小鼠角膜病理生理改變和上皮/神經(jīng)損害,以及高遷移率族蛋白B1(High Mobility Group B1,HMGB1)及下游信號因子晚期糖基化終產(chǎn)物受體(Receptor of Advanced Glycation Endproducts,RAGE)在DK發(fā)生發(fā)展中的變化;探討抑制HMGB1在糖尿病模型小鼠角膜上皮/神經(jīng)損傷后修復中的作用;構(gòu)建載藥甘草酸二鉀納米膠束滴眼液后,評價甘草酸二鉀納米膠束滴眼液協(xié)同調(diào)控HMGB1信號通路促進糖尿病模型小鼠角膜上皮/神經(jīng)損傷后的修復。方法1.C57BL/6J小鼠腹腔注射STZ建立Ⅰ型糖尿病模型。于造模成功后4、8、12、16周測量同齡正常鼠和糖尿病鼠的體重、血糖、淚液分泌量、眼壓等指標;利用裂隙燈觀察各組小鼠角膜熒光素鈉與虎紅著色情況;掃描電...

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
第一章 綜述
    1.1 糖尿病性角膜病變中眼部相關(guān)變化
        1.1.1 角膜變化
            1.1.1.1 角膜上皮層
            1.1.1.2 Bowman層
            1.1.1.3 基質(zhì)層
            1.1.1.4 Descemet膜
            1.1.1.5 內(nèi)皮層
        1.1.2 結(jié)膜參與
        1.1.3 淚膜的變化
        1.1.4 糖尿病角膜神經(jīng)
        1.1.5 角膜觸覺
    1.2 糖尿病角膜病變分子機制
        1.2.1 生長因子
        1.2.2 核因子紅細胞2相關(guān)因子2(Nrf2)
        1.2.3 晚期糖基化終產(chǎn)物和活性氧
        1.2.4 Sirtuin1
        1.2.5神經(jīng)激肽1
    1.3 HMGB1與糖尿病眼病
        1.3.1 HMGB1及其相關(guān)信號通路
        1.3.2 HMGB1信號通路與糖尿病并發(fā)癥
        1.3.3 HMGB1信號通路與眼部疾病
        1.3.4 HMGB1抑制劑在治療疾病中的作用
    1.4 甘草酸概述
        1.4.1 甘草酸簡介
        1.4.2 甘草酸的安全問題
        1.4.3 甘草酸抑制HMGB1的生成與釋放
    1.5 Gen
        1.5.1 Gen基本介紹
        1.5.2 Gen藥理活性
        1.5.3 Gen在眼科領(lǐng)域的應用
    1.6 技術(shù)路線與研究意義
第二章 HMGB1信號通路在糖尿病性角膜病變發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料試劑與儀器設(shè)備
            2.1.1.1 實驗動物
            2.1.1.2 實驗耗材與試劑
            2.1.1.3 實驗儀器
            2.1.1.4 主要溶液的配制
        2.1.2 實驗方法
            2.1.2.1 糖尿病小鼠模型(Ⅰ型)的建立
            2.1.2.2 小鼠眼壓及角膜敏感度測試
            2.1.2.3 小鼠眼淚分泌量檢測
            2.1.2.4 小鼠眼前節(jié)裂隙燈觀察
            2.1.2.5 小鼠角膜掃描電鏡(SEM)觀察
            2.1.2.6 小鼠角膜上皮凋亡檢測(TUNEL染色)
            2.1.2.7 小鼠角膜神經(jīng)染色
            2.1.2.8 小鼠角膜上皮損傷修復觀察
            2.1.2.9 蛋白質(zhì)印跡法(Western blot法)
            2.1.2.10 免疫組化
            2.1.2.11 統(tǒng)計分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 糖尿病小鼠基本變化
        2.2.2 糖尿病小鼠眼表變化
        2.2.3 糖尿病小鼠角膜上皮與角膜內(nèi)皮微觀結(jié)構(gòu)的改變
        2.2.4 糖尿病小鼠上皮細胞凋亡嚴重
        2.2.5 糖尿病小鼠角膜神經(jīng)密度與角膜敏感度的改變
        2.2.6 糖尿病病程進展中角膜組織中HMGB1表達變化規(guī)律
        2.2.7 糖尿病小鼠角膜上皮愈合延遲
        2.2.8 糖尿病小鼠角膜神經(jīng)損傷修復延遲
        2.2.9 角膜上皮損傷后小鼠角膜中HMGB1表達變化
    2.3 本章討論與小結(jié)
第三章 抑制HMGB1信號通路對糖尿病性角膜病變的治療作用
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料試劑與儀器設(shè)備
            3.1.1.1 實驗動物
            3.1.1.2 實驗試劑與儀器
        3.1.2 實驗方法
            3.1.2.1 糖尿病小鼠角膜上皮損傷修復模型的建立
            3.1.2.2 糖尿病小鼠角膜神經(jīng)染色
            3.1.2.3 Western blot法
            3.1.2.4 統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 結(jié)膜下分別注射甘草酸二鉀對糖尿病小鼠角膜上皮損傷修復的作用
        3.2.2 結(jié)膜下分別注射甘草酸二鉀對糖尿病小鼠角膜神經(jīng)損傷修復的作用
        3.2.3 Western blot實驗結(jié)果
    3.3 本章討論與小結(jié)
第四章 甘草酸二鉀納米膠束多靶點調(diào)控HMGB1信號通路防治糖尿病性角膜病變
    4.1 材料和方法
        4.1.1 實驗材料與儀器設(shè)備
            4.1.1.1 實驗動物
            4.1.1.2 實驗試劑與耗材
            4.1.1.3 實驗儀器
        4.1.2 實驗方法
            4.1.2.1 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的制備
            4.1.2.2 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的表征
            4.1.2.3 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的儲存穩(wěn)定性
            4.1.2.4 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液抗氧化能力考察
            4.1.2.5 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液PAMPA及體外釋放
            4.1.2.6 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液安全性考察
            4.1.2.7 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液小鼠角膜吸收
            4.1.2.8 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液藥效學實驗
            4.1.2.9 統(tǒng)計分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的處方優(yōu)化
        4.2.2 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的外觀及微觀特征
        4.2.3 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的穩(wěn)定性
        4.2.4 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的抗氧化能力
        4.2.5 甘草酸二鉀顯著促進Gen的透膜性與釋放能力
        4.2.6 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液的安全性
        4.2.7 甘草酸二鉀促進小鼠角膜的在體吸收
        4.2.8 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液藥效學結(jié)果
            4.2.8.1 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液促進糖尿病小鼠角膜上皮損傷修復
            4.2.8.2 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液促進角膜上皮損傷后角膜神經(jīng)和敏感度修復
            4.2.8.3 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液有效抑制糖尿病角膜HMGB1 信號通路
            4.2.8.4 甘草酸二鉀-Gen納米膠束滴眼液顯著降低糖尿病角膜中炎癥因子的表達
    4.3 本章討論與小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄



本文編號：3963972