目的觀察成纖維細(xì)胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)對眼瞼基底細(xì)胞癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)增殖、凋亡的影響。方法分離培養(yǎng)鑒定眼瞼CAFs和正常成纖維細(xì)胞(normal fibroblasts,NFs)。CAFs隨機(jī)分為對照組、過表達(dá)組(FAP)、敲降組(FAP shRNA)、空載組(隨機(jī)shRNA)、抑制劑組[FAP shRNA+第10號(hào)染色體上磷酸酶和張力蛋白同源缺失的基因(PTEN)抑制劑bpv],MTT法觀察增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡,Western blot法檢測觀察眼瞼CAFs FAP、PTEN、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt蛋白。結(jié)果培養(yǎng)并鑒定眼瞼CAFs和NFs。與對照組、空載組比較,過表達(dá)組吸光度(A)值增加,凋亡率降低,FAP、p-PI3K、p-Akt表達(dá)升高,PTEN表達(dá)降低,敲降組、抑制劑組A值減小,凋亡率升高,FAP、p-PI3K、p-Akt表達(dá)降低,PTEN表達(dá)升高(P<0.05);抑制...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 標(biāo)本來源
        1.1.2 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞分離、培養(yǎng)
        1.2.2 細(xì)胞鑒定
        1.2.3 細(xì)胞分組及干預(yù)
        1.2.4 眼瞼CAFs增殖檢測
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 眼瞼CAFs鑒定
    2.3 眼瞼CAFs增殖情況
    2.4 眼瞼CAFs凋亡情況
    2.5 眼瞼CAFs FAP、PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表達(dá)
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