由角膜病引發(fā)的角膜混濁是致盲的重要原因之一。Mycn是Myc原癌基因家族的一員,主要參與細胞增殖、凋亡、分化等多種細胞過程。國內(nèi)外對Mycn基因的研究重點圍繞腫瘤的發(fā)生。在先前的研究中,本實驗室使用化學(xué)誘變劑乙烷基亞硝基脲（ENU）誘導(dǎo)小鼠突變獲得一例Mycn基因點突變角膜混濁小鼠模型。隨后從美國杰克遜實驗室引入MycntmlPsk/J（Mycnflox/+）鼠以及廣泛表達Cre重組酶的EIIa-Cre工具鼠,進一步確定了Mycn基因突變與角膜混濁的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)部分角膜混濁小鼠在初生時呈眼瞼開放表型,故將角膜混濁小鼠分為初生時眼瞼閉合型及開放型兩種,并已對眼瞼開放型角膜病的發(fā)生原因進行研究。本研究主要目的是確定Mycn基因上皮特異性敲除是否也可以獲得類似的角膜病表型并進一步對其中眼瞼閉合型角膜病的發(fā)生機制進行初探。1.Mycn基因上皮特異性敲除角膜病小鼠的獲得將從美國杰克遜實驗室引入的Mycntm1Psk/J(Mycnflox/+小鼠以及皮膚特異性表達Cre重組酶的K14-Cre工具鼠兩種小鼠配種,最終獲得上皮特異性Mycn基因敲除小鼠（Mycn-/+）,該小鼠出生后表現(xiàn)為角膜混濁... 

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
文獻綜述
    一 MYC的研究進展
        1 MYC的發(fā)現(xiàn)
        2 MYC蛋白結(jié)構(gòu)及功能
        3 MYC的生物學(xué)功能
            3.1 MYC與細胞分化
            3.2 MYC與細胞周期
            3.3 MYC與細胞凋亡
            3.4 MYC與細胞代謝
        4 Myc家族基因
            4.1 c-Myc
            4.2 l-Myc
            4.3 Mycn
                4.3.1 Mycn與腫瘤
                4.3.2 Mycn在發(fā)育中的研究
    二 角膜與角膜病
        1 角膜的結(jié)構(gòu)與功能
            1.1 上皮細胞層(Epithelium)
            1.2 前彈性層(Bowman's membrane)
            1.3 基質(zhì)層(Stroma)
            1.4 后彈性層(Descemet's membrane)
            1.5 內(nèi)皮層(Endothelium)
        2 角膜病
            2.1 peters'異常(PA)
            2.2 先天性內(nèi)皮營養(yǎng)不良(CHED)
            2.3 后部多形性營養(yǎng)不良(PPMD)
    三 晶狀體泡及角膜的發(fā)生
        1 胚眼的發(fā)生概況
        2 與晶狀體泡脫離相關(guān)的部分基因
            2.1 E-cadherin、N-cadherin (E-和N-鈣粘基因)
            2.2 FoxE3
            2.3 AP-2α
            2.4 Pax6
            2.5 c-Myc
    四 本研究目的與意義
實驗部分
    第一章 Mycn基因上皮特異性敲除角膜病小鼠的獲得
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
                1.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實驗方法
                1.2.1 上皮特異性Mycn基因敲除小鼠的獲得
                1.2.2 基因型鑒定
        2 結(jié)果
            2.1 Mycn基因上皮特異性敲除小鼠繁殖與分型
            2.2 Mycn~(-/+)小鼠眼部表型
            2.3 遺傳實驗統(tǒng)計結(jié)果
        3 討論
    第二章 Mycn~(-/+)小鼠角膜病理組織學(xué)觀察
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
                1.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實驗方法
                1.2.1 小鼠獲得
                1.2.2 小鼠角膜組織HE染色
                1.2.3 小鼠角膜組織免疫組織化學(xué)染色
        2 結(jié)果
            2.1 小鼠眼球HE染色結(jié)果
            2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
                2.2.1 細胞角蛋白K12、K14及K10免疫組化結(jié)果
                2.2.2 整合素亞單位beta4免疫組化結(jié)果
        3 討論
    第三章 Mycn~(-/+)小鼠晶狀體泡分離缺陷及其機制的研究
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
                1.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)條件
                1.1.2 主要儀器和設(shè)備
                1.1.3 主要試劑
            1.2 實驗方法
                1.2.1 胚胎期小鼠的獲得
                1.2.2 小鼠胚胎眼免疫組織化學(xué)分析
        2 結(jié)果
            2.1 HE染色結(jié)果
            2.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果
                2.2.1 E-cadherin免疫組化結(jié)果
                2.2.2 N-cadherin免疫組化結(jié)果
                2.2.3 FOXE3免疫組化結(jié)果
        3 討論
全文總結(jié)
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Map3k1調(diào)控小鼠眼瞼閉合的研究進展[J]. 吳劉成,邵義祥.  動物學(xué)雜志. 2011(03)

碩士論文
[1]Mycn突變角膜混濁小鼠角膜病變特點及機制的研究[D]. 漆重陽.揚州大學(xué) 2019
[2]Mycn基因敲除引起小鼠角膜混濁及其機制的初步研究[D]. 陳瑞.揚州大學(xué) 2019
[3]角膜混濁小鼠模型獲得及其分子基礎(chǔ)研究[D]. 倪俊達.揚州大學(xué) 2015



本文編號：3679231