目的研究白藜蘆醇（resveratrol,RES）對碘酸鈉誘導的人視網(wǎng)膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）細胞凋亡的抑制作用及機制,探索該藥是否可用于干性年齡相關(guān)性黃斑變性（age-related macular degeneration,AMD）的治療。方法通過碘酸鈉誘導的RPE細胞模擬干性AMD。RPE細胞傳代培養(yǎng)分為空白對照組、碘酸鈉損傷組、RES+碘酸鈉損傷組,并觀察各組細胞形態(tài)。MTT法檢測RES對RPE細胞最佳保護作用的濃度以及最佳濃度下對不同濃度碘酸鈉損傷的RPE細胞的保護作用。Western blot檢測各組細胞的凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達情況。Hosste33342及流式細胞術(shù)檢測各組細胞的凋亡總量變化以及凋亡種類之間的差別。結(jié)果 5μmol·L^-1 RES對RPE細胞有較強的保護作用且此濃度下對不同損傷程度的RPE細胞都有較強的保護作用。RES+碘酸鈉損傷組Bax蛋白的相對表達量（0.45±0.07）明顯低于碘酸鈉損傷組（0.90±0.09）,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,與空白對照組（0.... 

【文章來源】：眼科新進展. 2019,39(06)北大核心

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光學顯微鏡下檢測培養(yǎng)24h后的ＲPE細胞狀態(tài)

嬲??仕笮危?鮒襯芰η?ＲES+NaIO3組細胞形態(tài)良好、長勢均勻、細胞略有形變、生長速度尚可、細胞間偶見細胞碎片;NaIO3組有大量細胞死亡，細胞量少，形態(tài)欠佳、分布呈團簇狀，細胞透光度增加。圖1光學顯微鏡下檢測培養(yǎng)24h后的ＲPE細胞狀態(tài)。A:Control組;B:ＲES+NaIO3組;C:NaIO3組。比例尺:100μm2．2MTT檢測最佳藥物濃度MTT檢測結(jié)果經(jīng)單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，在ＲES濃度為5μmol·L－1時細胞生存率最高，且與其他濃度下細胞生存率差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05，見圖2)，此時藥物對細胞無不良影響、沒有明顯的細胞毒性，可以排除藥物的不良干擾因素。通過ＲES對各組細胞不同程度損傷的保護效果分析發(fā)現(xiàn)，無論是輕度損傷還是重度損傷，ＲES對PＲE細胞皆有很強的保護作用，且對中度損傷效果最佳。ＲES+NaIO3組細胞生存率均明顯優(yōu)于NaIO3各濃度組，差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05)。2．3Westernblot檢測結(jié)果Westernblot法檢測各組相關(guān)蛋白的表達情況，結(jié)果見圖3。NaIO3組較圖2ＲES濃度為5μmol·L－1時，各NaIO3組ＲPE細胞的生存率Control組凋亡蛋白Bax的表達量顯著上升(P＜0.05)，Bcl-2的表達量顯著下降(P＜0．05)，細胞損傷嚴重。ＲES+NaIO3組相關(guān)蛋白表達量與Control組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與NaIO3組有明顯差別，其中ＲES+NaIO3組Bax蛋白的表達量明顯低于NaIO3組，Bcl-2蛋白的表達量較NaIO3組明顯下降。且兩組蛋白之間表達差異均有統(tǒng)計學意義(均為P＜0．05)。圖3Westernblot法檢測各組Bax(A)和Bcl-2蛋白(B)的表達量以及各組灰度值的比

Westernblot法檢測各組Bax(A)

【參考文獻】：
期刊論文
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