發(fā)布時間：2021-11-11 18:40

　　目的探討微小RNA-124-3p（miR-124-3p）對H₂O₂誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細胞增殖及凋亡的影響及其靶向調(diào)控Krüppel樣因子6（Krüppel like factor 6,KLF6）的機制。方法按HLE-B3細胞處理方式的不同,將其分為HLE-B3組、HLE-B3+H₂O₂組、HLE-B3+H₂O₂+miR-NC組、HLE-B3+H₂O₂+miR-124-3p組、HLE-B3+H₂O₂+si-NC組、HLE-B3+H₂O₂+si-KLF6組、miR-124-3p+pcDNA3.1組、miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6組。利用MTT實驗檢測各組HLE-B3細胞增殖活性,流式細胞儀檢測各組HLE-B3細胞凋亡。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CmiR-124-3p與KLF6的靶向關(guān)系。Western blot檢測... 

【文章來源】：眼科新進展. 2020,40(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

過表達miR-124-3p對H2O2誘導(dǎo)的細胞HLE-B3凋亡蛋白表達的影響

si-KLF6轉(zhuǎn)染至HLE-B3細胞后用H2O2誘導(dǎo)處理結(jié)果顯示,HLE-B3+H2O2+si-KLF6組HLE-B3細胞中KLF6蛋白表達水平較HLE-B3+H2O2+si-NC組顯著降低(P<0.05),細胞增殖活性顯著增強(P<0.05),細胞凋亡率顯著降低(P<0.05),Cyclin D1、Bcl-2蛋白表達水平均顯著升高(均為P<0.05),P21、Bax蛋白表達水平均顯著降低(均為P<0.05),見圖2、表6、表7。表6 抑制KLF6的表達對H2O2誘導(dǎo)的細胞HLE-B3增殖、凋亡的影響 ( x ˉ ±s,n=30) 組別 A值 12 h 24 h 36 h HLE-B3組 1.57±0.15 1.02±0.10 0.77±0.07 HLE-B3+H2O2組 0.86±0.08a 0.45±0.04a 0.23±0.02a HLE-B3+H2O2+si-NC組 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.02 HLE-B3+H2O2+si-KLF6組 1.19±0.10b 0.70±0.07b 0.41±0.04b 注:與HLE-B3組比較,aP<0.05;與HLE-B3+H2O2+si-NC組比較,bP<0.05

表7 抑制KLF6的表達對H2O2誘導(dǎo)的細胞HLE-B3增殖、凋亡蛋白的表達及細胞凋亡率的影響 ( x ˉ ±s,n=30) 組別 KLF6蛋白 Cyclin D1蛋白 P21蛋白 Bax蛋白 Bcl-2蛋白 細胞凋亡率/% HLE-B3 0.15±0.01 0.97±0.09 0.16±0.01 0.24±0.02 0.87±0.09 7.36±0.74 HLE-B3+H2O2 0.66±0.06a 0.40±0.04a 0.81±0.08a 0.84±0.08a 0.27±0.03a 19.17±1.30a HLE-B3+H2O2+si-NC 0.64±0.06 0.39±0.04 0.79±0.07 0.86±0.08 0.29±0.03 19.29±1.33 HLE-B3+H2O2+si-KLF6 0.29±0.02a 0.74±0.07b 0.33±0.03b 0.51±0.05b 0.60±0.06b 11.46±1.02b 注:與HLE-B3組比較,aP<0.05;與HLE-B3+H H2O2+HLE-B3+H2O2+miR-NC組比較,bP<0.05表8 過表達KLF6環(huán)境下miR-124-3p對H2O2誘導(dǎo)的細胞HLE-B3增殖的影響 ( x ˉ ±s,n=36) 組別 細胞活性(A值) 12 h 24 h 36 h miR-NC組 0.88±0.08 0.46±0.04 0.24±0.03 miR-124-3p組 1.28±0.11a 0.75±0.07a 0.44±0.04a miR-124-3p+pcDNA3.1組 1.26±0.12 0.78±0.07 0.45±0.04 miR-124-3p+pcDNA3.1-KLF6組 1.10±0.11b 0.60±0.05b 0.35±0.03b 注:與miR-NC組比較,aP<0.05;與miR-124-3p+pcDNA3.1組比較,bP<0.05

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]MicroRNA在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)晶狀體上皮細胞凋亡中作用的初步研究[J]. 柏凌,李鵬,陳凌,何玲,王峰.  國際眼科雜志. 2014(10)
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本文編號：3489326