目的：探討TGF-β及其下游信號Smad在糖尿病視網(wǎng)膜病變組織纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用。通過研究糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織中TGF-β、Smad2/3、以及其相關蛋白a-SMA、MMP-2、PAI-1、Col-1、VEGF、CTGF的表達變化,揭示糖尿病視網(wǎng)膜病變的TGF-β/Smad信號通路的作用機制,從分子水平完善糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機制,探討可行的基因治療或藥物防治手段。方法：1.體內實驗（1）動物模型建立：雄性SD大鼠,體重200±25g, STZ（美國Sigma公司產(chǎn)品,pH值為4.2,劑量為55mg/kg,溶于0.1mmol/L枸櫞酸鈉與0.2mmol/L磷酸二氫鈉）一次性大量腹腔注射,在48h后采尾血測血糖,后期每2周分別測血糖和體重,將血糖濃度>16.7mmol/L定為糖尿病大鼠。實驗動物于第4、8、12周稱體重和測血糖后取材。（2）應用RT-PCR, western blotting測定隨病程延長檢測視網(wǎng)膜中TGF-β、a-SMA、MMP-2、Smad2/3、PAI-1、COL-1、 VEGF、CTGF的定位及mRNA,蛋白的動態(tài)變化。2.體外實驗：（1）體外培養(yǎng)大鼠... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３ｘ１００?

ＡＲＰＥ－１９細胞株傳代后２－３ｈ開始貼壁生長，４８ｈ基本完全貼壁，２－３ｄ能長??滿２５ｃｍ２培養(yǎng)瓶。大部分細胞呈典型長梭形，長滿培養(yǎng)瓶底后呈現(xiàn)接觸性抑制。??見圖４、５、６。??—ｉＭｉ??ｉ＾Ｍ?ｍ??圖?５?ｘ２００?圖?６?ｘ４０??２４??

相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計學意義；??４對于ａ－ＳＭＡ，?７５ｍＭ糖作用時表達最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計學意??義，２５ｍＭ時，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計學意義；??５對于ＭＭＰ－２，?７５ｍＭ糖作用時表達最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計學意??義；??托對于ＰＡＩ－１，?７５ｍＭ糖作用時表達達到第一個高峰，與正常組比較，ｐ＜０．０５，??有統(tǒng)計學意義，５０ｍＭ時表達稍有下降，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計學意義；??７對于〔化－１，５０ｍＭ糖作用時表達即達到最大，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)??計學意義；２５ｍＭ，?ｌＯＯｍＭ時表達下降，與正常組相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計學意義；??８．對于ＣＴＧＦ，５０ｍＭ糖作用時表達即達到最大，之后隨糖濃度增加，表達迅速??下降，與正常組比較，ｐ＜０．０５，有統(tǒng)計學意義，ｌＯＯｍＭ時表達下降，與正常組??相比ｐ＞０．０５，無統(tǒng)計學意義。??＇蔓??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Crystal Structure of the MH2 domain of Drosophila Mad[J]. WANG Chong,CHEN Lei,WANG Le & WU JiaWei MOE Key Laboratory of Bioinformatics,Department of Biological Sciences and Biotechnology,Tsinghua University,Beijing 100084,China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2009(06)



本文編號：3451987