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siRNA沉默S100A8與S100A9基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞CNE1遷移功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-10 10:42
  本論文包括兩個(gè)部分:(一)siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達(dá)的影響及有效片段的篩選;(二)S100A8 siRNA與S100A9siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE1遷移功能的影響。第一部分:siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNEl中S100A8、S100A9基因表達(dá)的影響及有效片段的篩選目的:通過將S100A8 siRNA、S100A9 siR NA分別轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞CNE1后,觀察S100A8、S100A9基因的表達(dá)水平變化以分別篩選有效片段。方法:1.分別合成三對(duì)S100A8 siRNA、S100A9 siRNA,分別標(biāo)記為:S100A8-Homo-286, S100A8-Homo-324, S100A8-Homo-374; S100A9-Homo-61, S100A9-Homo-100, S100A9-Homo-267,利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000瞬時(shí)轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞CNE1。采用標(biāo)記有熒光的陰性對(duì)照FAM-siRNA在熒光顯微鏡下檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率;2.轉(zhuǎn)染24 h后,通過熒光定量PCR分別檢測(cè)S100A8、S100A9的相對(duì)表達(dá)水平,分別篩選出干擾效... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
個(gè)人簡(jiǎn)歷
英文縮略語(yǔ)表
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達(dá)的影響及有效片段的篩選
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞系
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 siRNA干擾片段的設(shè)計(jì)與合成
        2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.4 鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化
        2.5 檢測(cè)siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE1中S100A8、S100A9基因表達(dá)的影響
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 鼻咽癌細(xì)胞siRNA的轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染條件的優(yōu)化
        3.2 S100A8、S100A9基因的相對(duì)表達(dá)情況
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE1遷移功能的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2 劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移功能
        2.3 熒光定量PCR法檢測(cè)MMP7基因的表達(dá)情況
    3 結(jié)果
        3.1 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對(duì)細(xì)胞遷移功能的作用
        3.2 S100A8 siRNA與S100A9 siRNA對(duì)MMP7表達(dá)的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
第三部分 課題綜述S100A8與S100A9蛋白在惡性腫瘤中的作用
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鼻咽癌患者血漿中S100A8和S100A9蛋白濃度測(cè)定及臨床意義[J]. 韓冉冉,黃元姣,陳鈴,肖曉蘭,易翔,蔡紅武,吳勇滸.  臨床檢驗(yàn)雜志. 2014(04)
[2]鼻咽癌伴區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)移規(guī)律及治療現(xiàn)狀[J]. 馬巖,孫磊,王立瑩,于雷,邱玲,賈曉晶.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2013(09)
[3]鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J]. 鄧彥君,朱建思,張志偉,唐微,盧小敏.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(08)
[4]Loss of myeloid-related proteins 8 and myeloid-related proteins 14 expression in human esophageal squamous cell carcinoma correlates with poor differentiation[J]. Jian-Ping Kong Fang Ding Chuan-Nong Zhou Xiu-Qin Wang Xiao-Ping Miao Min Wu Zhi-Hua Liu National Laboratory of Molecular Oncology,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,ChinaDepartment of Etiology and Carcinogenesis,Cancer Institute,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100021,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(08)



本文編號(hào):3179226

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