非諾貝特對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性的保護(hù)作用
發(fā)布時(shí)間:2017-04-19 12:03
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【摘要】:目的:研究非諾貝特在碘酸鈉誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性的保護(hù)作用,并探討其可能的作用機(jī)制。方法:(1)細(xì)胞實(shí)驗(yàn):選取人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞穩(wěn)定細(xì)胞系(ARPE-19),采用不同濃度碘酸鈉刺激細(xì)胞,確定本實(shí)驗(yàn)碘酸鈉刺激濃度。采取不同濃度非諾貝特預(yù)處理細(xì)胞2小時(shí),使用確定濃度的碘酸鈉處理細(xì)胞24小時(shí)后收集細(xì)胞,檢測(cè)凋亡相關(guān)指標(biāo)的變化。(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):雄性C57BL/6小鼠尾靜脈注射碘酸鈉溶液(50mg/kg)誘導(dǎo)視網(wǎng)膜變性。對(duì)小鼠飼予含0.1%非諾貝特飼料預(yù)處理3天,經(jīng)碘酸鈉尾靜脈注射3天后處死小鼠,取眼球組織檢測(cè)視網(wǎng)膜細(xì)胞變性凋亡相關(guān)蛋白表達(dá),Müller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化及炎癥細(xì)胞變化。結(jié)果:(1)細(xì)胞實(shí)驗(yàn):在ARPE-19細(xì)胞中,非諾貝特預(yù)處理組與單純碘酸鈉處理組相比,TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)具有顯著性差異(P0.01),蛋白印跡與免疫熒光結(jié)果顯示,caspase3的表達(dá)顯著降低,MTT結(jié)果顯示非諾貝特顯著提高細(xì)胞活性。(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):碘酸鈉(50mg/kg)靜脈注射后,TUNEL染色發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡明顯增加,呈時(shí)間依賴性,第三天達(dá)到細(xì)胞凋亡高峰。Muller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化與細(xì)胞凋亡結(jié)果相一致。非諾貝特干預(yù)組與單純碘酸鈉注射組比較,TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)具有顯著性差異(P0.01)。免疫熒光顯示,非諾貝特處理組與碘酸鈉注射組比較,活化的半胱天冬酶蛋白caspase3表達(dá)量顯著降低,下調(diào)膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP表達(dá)量,炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白CD11b表達(dá)水平顯著降低。結(jié)論:非諾貝特對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)視網(wǎng)膜變性有保護(hù)性作用,作用機(jī)制可能與部分性抑制視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡通路的活化有關(guān)。非諾貝特可以減輕碘酸鈉刺激引起的Müller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化及炎癥反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】:非諾貝特 視網(wǎng)膜變性 凋亡 caspase3蛋白 炎癥 Müller細(xì)胞 細(xì)胞 動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R774.1
【目錄】:
- 摘要3-4
- abstract4-8
- 中英文縮略詞表8-9
- 前言9-12
- 第一部分 非諾貝特對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞損傷的作用12-23
- 1.1 材料12-15
- 1.1.1 細(xì)胞系12
- 1.1.2 主要試劑材料12-13
- 1.1.3 主要儀器13
- 1.1.4 主要試劑配制13-15
- 1.2 方法15-18
- 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)15
- 1.2.2 免疫熒光15-16
- 1.2.3 TUNEL檢測(cè)16
- 1.2.4 蛋白印跡16-18
- 1.2.5 MTT檢測(cè)細(xì)胞活性18
- 1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18
- 1.3 結(jié)果18-21
- 1.3.1 碘酸鈉誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞凋亡18-19
- 1.3.2 不同濃度的非諾貝特減少碘酸鈉誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡19-21
- 1.3.3 MTT檢測(cè)非諾貝特對(duì)細(xì)胞活性的影響21
- 1.4 討論21-23
- 第二部分非諾貝特對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜變性的作用23-32
- 2.1 材料23-25
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
- 2.1.2 主要試劑材料23-24
- 2.1.3 主要儀器24
- 2.1.4 主要試劑配制24-25
- 2.2 方法25-26
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立及分組25
- 2.2.2 組織樣本制備25-26
- 2.2.3 冰凍切片26
- 2.2.4 免疫熒光(組織切片)26
- 2.2.5TUNEL檢測(cè)(組織切片)26
- 2.3 結(jié)果26-30
- 2.3.1 碘酸鈉誘導(dǎo)視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷時(shí)間曲線研究26-28
- 2.3.2 非諾貝特抑制視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡情況28-29
- 2.3.3 非諾貝特對(duì)視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化影響29
- 2.3.4 非諾貝特對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷炎癥反應(yīng)的影響29-30
- 2.4 討論30-32
- 結(jié)論32-33
- 致謝33-34
- 參考文獻(xiàn)34-40
- 綜述40-46
- 參考文獻(xiàn)44-46
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 沈軼;莊沛;林寶琴;張婉玉;George C Y Chiou;;Tetramethylpyrazine在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞變性及脈絡(luò)膜血流和RPE細(xì)胞氧化應(yīng)激中的作用(英文)[J];國際眼科雜志;2010年10期
本文關(guān)鍵詞:非諾貝特對(duì)碘酸鈉誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性的保護(hù)作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):316214
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