發(fā)布時(shí)間：2021-03-07 01:43

　　背景:糖尿病性視網(wǎng)膜病變中關(guān)于新生血管的研究多局限于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子,而6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶（phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase,PFKFB3）也有一定的作用。目的:探討PFKFB3小干擾RNA（siRNA）對(duì)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用及機(jī)制。方法:將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分為4組:正常糖組（5.5mmol/L葡萄糖）、正常糖+PFKFB3-siRNA組、高糖組（30mmol/L葡萄糖）、高糖+PFKFB3-siRNA組。正常糖+PFKFB3-siRNA組和高糖+PFKFB3-siRNA組以PFKFB3-siRNA轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。采用Westernblot檢測(cè)PFKFB3的沉默表達(dá)效果,并選取沉默效果最佳者進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。體外管腔形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞成管能力,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)PFKFB3的m RNA表達(dá),Western blot檢測(cè)PFKFB3及磷酸化AKT/AKT的蛋白表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:①PFKFB3-siRNA能明顯抑制PFKFB3的蛋白表達(dá)（P <0.01）;②與正常糖組相比,正常... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)組織工程研究. 2020,24(14)北大核心

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【部分圖文】：

PFKFB3 siRNA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞PFKFB3蛋白表達(dá)的影響(Western blot)

圖2 PFKFB3 siRNA對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞PFKFB3蛋白表達(dá)的影響(Western blot)圖4 PFKFB3 siRNA對(duì)高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞管腔形成能力的影響

圖3 PFKFB3 siRNA對(duì)高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中PFKFB3(A)和AKT(B)表達(dá)的影響內(nèi)皮細(xì)胞擁有高度的無(wú)氧糖酵解活性，促新生血管因子可以明顯上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞中PFKFB3的表達(dá)[26]，而敲除內(nèi)皮細(xì)胞中的PFKFB3可以明顯減少無(wú)氧糖酵解，表明PFKFB3在內(nèi)皮細(xì)胞中扮演著重要的作用，內(nèi)皮細(xì)胞中的PFKFB3同時(shí)參與病理性血管生成[12]。作者通過(guò)觀察PFKFB3-siRNA對(duì)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞管腔形成的影響，發(fā)現(xiàn)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的PFKFB3蛋白及其mRNA表達(dá)均明顯升高，這與作者所在課題組前期研究結(jié)果一致[15]，說(shuō)明高糖可以刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的PFKFB3增加。血管內(nèi)皮細(xì)胞包括大血管內(nèi)皮細(xì)胞和微血管內(nèi)皮，在高糖環(huán)境下細(xì)胞功能存在一定的差異[27]，此次實(shí)驗(yàn)使用臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞不能完全說(shuō)明PFKFB3在糖尿病性視網(wǎng)膜病變中的作用，作者將在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中將進(jìn)一步采用微血管血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)，以排除這一可能差異。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]玻璃體腔注射抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子藥物相關(guān)并發(fā)癥概述[J]. 曾子善,翁文慶.  浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2019(07)
[2]6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶（PFKFB3）抑制劑3PO對(duì)高糖環(huán)境下人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞新生血管形成的影響[J]. 胡萍,韋芳,顧青,曹陽(yáng),田敏,呂紅彬.  眼科新進(jìn)展. 2019(05)
[3]糖尿病視網(wǎng)膜病變玻璃體切割術(shù)后繼發(fā)新生血管性青光眼的原因分析[J]. 張勤,劉君,陳連英.  中國(guó)實(shí)用醫(yī)刊. 2019 (05)
[4]PFKFB3、S1P2在2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)及tBHQ的干預(yù)作用[J]. 田敏,余曦,呂紅彬.  眼科新進(jìn)展. 2018(02)
[5]視網(wǎng)膜激光光凝與復(fù)合式小梁切除術(shù)治療新生血管性青光眼的臨床療效對(duì)比[J]. 武海玲,馬曉梅,才讓當(dāng)周,余蓮桂,王發(fā)旺,王玲.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(17)

碩士論文
[1]PFKFB3在PDR患者玻璃體和血清中的表達(dá)及其相關(guān)性分析[D]. 唐敏.西南醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3068181