本文關(guān)鍵詞：外毛細(xì)胞側(cè)壁結(jié)構(gòu)在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：耳蝸毛細(xì)胞分為內(nèi)毛細(xì)胞(Inner Hair cells,IHCs)與外毛細(xì)胞(Outer Hair cells,OHCs)。內(nèi)毛細(xì)胞的作用是將內(nèi)耳感受到的聲信號(hào)轉(zhuǎn)換成神經(jīng)沖動(dòng),而外毛細(xì)胞作為corti感受器的一部分,主要是作為聲音機(jī)械刺激的效應(yīng)器來(lái)發(fā)揮作用,也就是在聲音傳遞到到內(nèi)毛細(xì)胞之前需經(jīng)過(guò)外毛細(xì)胞的修飾,從而保證耳蝸對(duì)聲音的精細(xì)分辨力和寬廣的強(qiáng)度感受范圍。而這一過(guò)程主要依靠外毛細(xì)胞的“電致運(yùn)動(dòng)”,即哺乳動(dòng)物外毛細(xì)胞在受到電刺激后,其胞體能夠隨電刺激的頻率發(fā)生相應(yīng)的快速伸縮變化。外毛細(xì)胞的伸縮運(yùn)動(dòng)的頻率高達(dá)幾萬(wàn)赫茲,如此高頻率的細(xì)胞伸縮運(yùn)動(dòng)必然伴隨著大量的能源物質(zhì)的消耗,但外毛細(xì)胞的電致運(yùn)動(dòng)又不依賴于ATP,那么外毛細(xì)胞的能量物質(zhì)是如何進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn),外毛細(xì)胞膜下特殊的三層結(jié)構(gòu)在其發(fā)揮怎樣的作用,以及這一轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程在電致運(yùn)動(dòng)中起到什么樣的作用至今仍未知。哺乳動(dòng)物大部分細(xì)胞主要是通過(guò)細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)體吸收基本能源物質(zhì),外毛細(xì)胞也不例外,但由于外毛細(xì)胞側(cè)膜結(jié)構(gòu)較為特殊,其側(cè)壁結(jié)構(gòu)是由質(zhì)膜層、網(wǎng)格層及表面下池三層組成,目前關(guān)于外毛細(xì)胞能量物質(zhì)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的研究較少,因此外毛細(xì)胞側(cè)膜結(jié)構(gòu)是否參與到基本能量物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)以及如何轉(zhuǎn)運(yùn)目前知之甚少。葡萄糖是細(xì)胞的基本能源物質(zhì),因此本研究通過(guò)活細(xì)胞共聚焦顯微鏡觀察外毛細(xì)胞吸收葡萄糖的過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)外毛細(xì)胞能夠吸收葡萄糖,并且可以看到外毛細(xì)胞吸收葡萄糖的量可隨葡萄糖的濃度及時(shí)間的增加而增加。隨后通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)闡明葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體各個(gè)亞型在外毛細(xì)胞上的表達(dá)分布情況,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明我們可以發(fā)現(xiàn)大部分葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體主要呈點(diǎn)狀分布在外毛細(xì)胞的側(cè)膜結(jié)構(gòu)及胞質(zhì)中,并且葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(Glut-1)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體-4(Glut-4)的分布較多,其中Glut-4主要分布在耳蝸外毛細(xì)胞側(cè)膜系統(tǒng)的內(nèi)側(cè)。進(jìn)而我們?cè)谙鄳?yīng)的培養(yǎng)液中加入Glut-1及Glut-4的抑制劑進(jìn)而觀察外毛細(xì)胞吸收葡萄糖的情況,發(fā)現(xiàn)葡萄糖吸收的量都較前明顯減少,但減少的程度不同,因此可得出外毛細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收過(guò)程可被調(diào)控。通過(guò)比對(duì)外毛細(xì)胞Glut-4、prestin以及P2X7的分布位置,三者均分布于外毛細(xì)胞側(cè)膜結(jié)構(gòu)上,三者位置分布極為相近,同時(shí)在加入P2X7受體激動(dòng)劑ATP后可發(fā)現(xiàn)外毛細(xì)胞吸收葡萄糖的量明顯增加。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)我們可知葡萄糖可通過(guò)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體進(jìn)入到外毛細(xì)胞內(nèi),并且這一過(guò)程能夠被調(diào)控。各型葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體分布于外毛細(xì)胞側(cè)膜系統(tǒng)上,因此我們可得出外毛細(xì)胞側(cè)壁結(jié)構(gòu)參與到外毛細(xì)胞基本能源物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程,同時(shí)外毛細(xì)胞Glut-4、prestin以及P2X7的分布位置極為相近,三者之間可能存在一定的聯(lián)系,但仍需進(jìn)一步研究探索。
【關(guān)鍵詞】：外毛細(xì)胞 電致運(yùn)動(dòng) 側(cè)壁結(jié)構(gòu) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R764.3
【目錄】：

• 英文縮略表6-7
• 摘要7-9
• Abstract9-10
• 前言10-13
• 第一部分 耳蝸外毛細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體亞型表達(dá)分布規(guī)律與特點(diǎn)研究13-25
• 材料與方法13-17
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑13-14
• 1.4 溶液配制14-15
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法15-17
• 2.1 免疫熒光法檢測(cè)七型葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體在耳蝸鋪片上的表達(dá)15-16
• 2.2 豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞的分離16
• 2.3 免疫熒光法檢測(cè)各型葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體在單離外毛細(xì)胞上的表達(dá)16-17
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-23
• 1.葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體亞型在昆明小鼠及豚鼠耳蝸鋪片免疫組化染色研究17-21
• 2.葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體各個(gè)亞型分布在外毛細(xì)胞上不同部位21-23
• 討論23-24
• 結(jié)論24-25
• 第二部分 外毛細(xì)胞側(cè)壁結(jié)構(gòu)參與基本能源物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)25-36
• 材料與方法25-30
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料25-28
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物25
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器25
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑25-26
• 1.4 溶液配制26-28
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法28-30
• 2.1 豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞的分離28
• 2.2 快速活細(xì)胞成像系統(tǒng)測(cè)定進(jìn)入外毛細(xì)胞內(nèi)的 2-NBDG的量28-29
• 2.3 外毛細(xì)胞上Glut-1、Glut-4 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體、prestin及細(xì)胞膜的染色29
• 2.4 測(cè)定加入WZB117、STF-31、Indinavir和ATP后進(jìn)入外毛細(xì)胞內(nèi)的 2-NBDG的量29-30
• 2.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)方法30
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-34
• 1 2-NBDG被轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入外毛細(xì)胞（OHCs）細(xì)胞質(zhì)30-31
• 2 隨著時(shí)間和濃度變化而變化的OHCs對(duì) 2-NBDG的攝取量31
• 3 GLUT-1 和GLUT-4 的抑制劑調(diào)控外毛細(xì)胞攝取 2-NBDG的過(guò)程31-32
• 4 通過(guò)染料以及抗體的染色對(duì)GLUT-4、prestin蛋白和P2X7的分布位置進(jìn)行對(duì)比32-34
• 討論34-35
• 結(jié)論35-36
• 未來(lái)展望36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 綜述39-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 碩士在讀期間發(fā)表及已完成的論文48
• 碩士在讀期間學(xué)術(shù)交流情況48
• 致謝48-50

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 于寧;耳蝸外毛細(xì)胞動(dòng)力蛋白對(duì)聽覺靈敏度與頻率響應(yīng)的調(diào)控機(jī)制[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

  本文關(guān)鍵詞：外毛細(xì)胞側(cè)壁結(jié)構(gòu)在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：297113