目的:觀察色素上皮衍生因子基因修飾的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs）對(duì)早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中PEDF、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表達(dá)的影響及對(duì)視網(wǎng)膜的保護(hù)作用。方法:胰蛋白酶消化法獲取人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs）并進(jìn)行體外擴(kuò)增,采用流式細(xì)胞學(xué)方法進(jìn)行鑒定其免疫表型。采用基因重組方法構(gòu)建慢病毒（lentivirus,LV）-PEDF載體并對(duì)其進(jìn)行基因測(cè)序。LV-PEDF以感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection,MOI）值為10、30、50體外轉(zhuǎn)染h UCMSCs,采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（real time quantitative polymerase chain reaction,real time-PCR... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

光學(xué)顯微鏡下hUCMSCs形態(tài)hUCMSCs呈長(zhǎng)梭形，漩渦狀生長(zhǎng)，A-C分別為×40，×100，×200ABC

圖 3 獲取人臍帶來(lái)源干細(xì)胞的不同方法，我們采取了類(lèi)似方法（i）和（iii）結(jié)合的方帶血管時(shí)，會(huì)存在大量 hWJSCs，并不需要會(huì)混雜有臍帶不同位置的干細(xì)胞，這樣的

組表達(dá) GFP 細(xì)胞數(shù)目及強(qiáng)度明顯增加（圖 4F）。轉(zhuǎn)染后 96 小時(shí)，10MOI 組 GFP表達(dá)較之前明顯增加（圖 4G），30MOI 組見(jiàn) GFP 表達(dá)強(qiáng)度也增加（圖 4H），而 50MOI 組細(xì)胞密集，GFP 表達(dá)未見(jiàn)明顯增強(qiáng)（圖 4I）。10MOI 10MOI 10MOI

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]LMP-1基因慢病毒重組體對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖影響及其表達(dá)[D]. 梁長(zhǎng)生.山西醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2966190