發(fā)布時間：2020-12-26 19:02

　　目的:通過雙側(cè)海馬立體定位注射慢病毒干預(yù)ATAD3A表達(dá),觀察線粒體分裂與融合在OSAS后認(rèn)知障礙中的作用。方法:60只SD大鼠隨機(jī)分為正常組（CON）、OSAS模型組（OSAS）、ATAD3A基因慢病毒敲低（ATAD3A-KD）及空病毒對照組（OSAS-LV）（每組15只）。ATAD3A-KD組及OSAS-LV組提前2周注射慢病毒;分別用免疫熒光、免疫印跡技術(shù)檢測慢病毒感染海馬效率;慢病毒轉(zhuǎn)染成功后構(gòu)建OSAS大鼠模型。檢測大鼠缺氧及復(fù)氧的鼠尾動脈血氧飽和度;采用Morris水迷宮評估大鼠行為學(xué)變化;FJC染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元的凋亡情況;通過WB檢測各組大鼠海馬p-Drp1、t-Drp1、MFN1/2的變化情況;免疫熒光檢測Drp1、MFN1/2在神經(jīng)細(xì)胞的定位。結(jié)果:1、雙側(cè)海馬注射ATAD3A轉(zhuǎn)染2周后,免疫熒光結(jié)果顯示海馬區(qū)均有陽性表達(dá)。WB檢測大鼠海馬組織ATAD3A表達(dá)水平較對照組降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。2、CIH模型建造過程中,OSAS大鼠有煩躁不安、呼吸加深加快、抬頭呼吸、白天嗜睡、胸腹反常呼吸等癥狀;缺氧期間大鼠鼠尾動脈血壓飽和度為（62.6... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

慢病毒轉(zhuǎn)染后大鼠海馬組織ATAD3A表達(dá)情況

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文黃琴17表3OSAS大鼠缺氧及復(fù)氧期鼠尾血氧飽和度的變化（x±s，n=40）Tab.3ChangesinbloodoxygensaturationduringhypoxiaandreoxygenationphasesintheCIHmodelrats(x±s,n=40)ExperimentalphrasesAnimalnumberSpo2(%)Hypoxiainterval4096.85±1.21Reoxygenationinterval4062.63±3.03*Note：comparisonbetweenreoxygenationintervalandhypoxiainterval，*P＜0.05.2.2大鼠行為學(xué)變化（Morris水迷宮）2.2.1定位航行實驗在本實驗中，采用Morris水迷宮觀察大鼠空間記憶和學(xué)習(xí)能力的變化情況，隨著大鼠探索時間的增加，逃避潛伏期的時間也越來越短，所行的軌跡的路程也越來越少。與正常組相比，OSAS組大鼠尋找平臺的時間較長（P＜0.05），ATAD3A-KD組大鼠尋找的平臺時間稍長（P＜0.05）。OSAS與OSAS-LV組大鼠尋找平臺的時間無明顯變化（P＞0.05）。與OSAS-LV組相比，海馬注射ATAD3A-KD組的大鼠尋找的時間降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（見表4、5，圖2、3、4）圖2OSAS認(rèn)知功能障礙大鼠在逃避潛伏期的代表性軌跡Fig.2TherepresentativetrackofescapelatencyinOSASratswithcognitiveimpairmentNote:Thepictureshowstypicalmovementtrackofratsinescapelatency.A.CONgroup;B.OSASgroup；C.OSAS-LV；DATAD3A-KD

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文黃琴18表4OSAS認(rèn)知功能障礙大鼠學(xué)習(xí)和記憶的變化情況（x±s,n=9）Tab.4AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairment(x±s,n=9)GroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON56.48±10.9339.56±39.3416.83±4.8413.09±2.0910.18±4.64OSAS75.46±26.3357.62±24.2654.43±13.0147.15±18.7929.21±8.05OSAS-LV75.04±2.0457.85±31.4455.91±34.4444.8±18.7926.35±15.74ATAD3A-KD64.19±1.7351.44±27.9538.31±6.4519.40±7.7713.23±5.01圖3OSAS認(rèn)知功能障礙大鼠學(xué)習(xí)和記憶的變化情況Figure3AlteredlearningandmemoryinOSASratswithcognitiveimpairmentNote：Escapelatencysignificanteffortsforgroups(F(4,100)=36.58,P＜0.0001)andfordays(F(3,100)=23.61,P＜0.0001),butnotforinteraction(F(12,100)=0.891,P＜0.5556)表5OSAS認(rèn)知功能障礙大鼠找到平臺的距離（x±s,n=9）Tab5.ThedistanceoffindingplatforminOSASratswithcognitiveimpairmentGroupFirstday(s)Secondday(s)Thirdday(s)Forthday(s)Fifthday（s）CON11.48±3.159.93±1.404.36±0.4613.09±2.093.16±0.43OSAS18.8±0.9213.18±0.9811.91±1.018.85±0.738.26±0.71OSAS-LV19.10±0.7714.49±2.2812.47±0.808.01±0.637.97±1.06ATAD3A-KD14.19±0.8510.74±0.614.77±0.803.70±0.913.30±0.42

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征動物模型大鼠小腦和海馬組織中谷氨酸水平的變化[J]. 徐軼,李向陽,單琳.  中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版). 2018(12)
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碩士論文
[1]JAK2/STAT3調(diào)控M1mAChR對OSAS大鼠學(xué)習(xí)、記憶能力的作用研究[D]. 胡詞.遵義醫(yī)科大學(xué) 2019
[2]OSAS大鼠海馬組織中α7nAChR的表達(dá)變化[D]. 戰(zhàn)靜.遵義醫(yī)科大學(xué) 2019
[3]多奈哌齊對OSAS大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制研究[D]. 李宓.遵義醫(yī)學(xué)院 2018



本文編號：2940290