本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇對(duì)Hep-2細(xì)胞的自噬及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】自噬是細(xì)胞死亡的重要方式,白藜蘆醇可通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞自噬性死亡,并促進(jìn)喉癌細(xì)胞株Hep-2凋亡,但白藜蘆醇是否通過(guò)誘導(dǎo)Hep-2細(xì)胞自噬而死亡,以及其在促自噬與促凋亡之間的關(guān)系并不清楚,本研究擬驗(yàn)證白藜蘆醇促Hep-2細(xì)胞自噬的作用,以及其促自噬與促凋亡之間的關(guān)系,為白藜蘆醇的抗腫瘤作用提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)�！痉椒ā縈TT法測(cè)定細(xì)胞存活,q RT-PCR和western blot分別分析m RNA和蛋白水平,MDC染色和透射電鏡分別檢測(cè)自噬小體和自噬泡,DCFH-DA染色法分析細(xì)胞內(nèi)活性氧水平,Hoechest33258染色檢測(cè)凋亡細(xì)胞,用SPSS 13.0軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析并作圖�！窘Y(jié)果】白藜蘆醇劑量和時(shí)間依賴(lài)性地減少Hep-2細(xì)胞的存活率,以80μM作用的效果作為顯著,白藜蘆醇劑量和時(shí)間依賴(lài)性地促進(jìn)Hep-2細(xì)胞自噬,以40μM和第6h時(shí)最為顯著,其增加LC3Ⅱ與LC3Ⅰ的比率,促進(jìn)beclin-1蛋白和m RNA的表達(dá),細(xì)胞內(nèi)的自噬泡和自噬小體數(shù)量也顯著增加,機(jī)制研究發(fā)現(xiàn),白藜蘆醇促Hep-2細(xì)胞自噬作用與其促活性氧增多有關(guān),經(jīng)白藜蘆醇處理后,Hep-2細(xì)胞內(nèi)活性氧增加約6倍,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),活性氧通過(guò)激活A(yù)MPK-m TOR途徑而促進(jìn)Hep-2細(xì)胞自噬的。用3MA和CQ抑制自噬則白藜蘆醇對(duì)Hep-2細(xì)胞的促凋亡作用顯著減弱�！窘Y(jié)論】白藜蘆醇能誘導(dǎo)Hep-2自噬,其濃度和時(shí)間依賴(lài)性上調(diào)LC3和beclin1表達(dá);白藜蘆醇促進(jìn)Hep-2 ROS生成,白藜蘆醇通過(guò)ROS介導(dǎo)AMPK-m TOR通路誘導(dǎo)Hep-2自噬;抑制自噬減低白藜蘆醇對(duì)Hep-2細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。
【關(guān)鍵詞】：白藜蘆醇 自噬 凋亡 Hep-2細(xì)胞 活性氧
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.65
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)5-6
• 摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 1 實(shí)驗(yàn)材料11
• 2 實(shí)驗(yàn)方法11-17
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-25
• 3.1 白藜蘆醇對(duì)Hep-2 生長(zhǎng)的影響17-18
• 3.2 白藜蘆醇劑量和時(shí)間依賴(lài)性地誘導(dǎo)Hep-2 自噬18-20
• 3.3 白藜蘆醇促進(jìn)Hep-2 細(xì)胞自噬及其形態(tài)變化20-21
• 3.4 白藜蘆醇誘導(dǎo)Hep-2 產(chǎn)生活性氧21-22
• 3.5 AMPK的活化參與了白藜蘆醇誘導(dǎo)Hep-2 自噬22-24
• 3.6 白藜蘆醇通過(guò)促進(jìn)Hep-2 自噬促進(jìn)其凋亡24-25
• 4 討論25-27
• 5 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-33
• 綜述33-58
• 參考文獻(xiàn)53-58
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果58-59
• 致謝59

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本文編號(hào)：290917