【摘要】：目的:(1)探討枸杞多糖對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷是否有保護(hù)作用(2)枸杞多糖對(duì)大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷保護(hù)作用可能的機(jī)制,為缺血再灌注損傷視網(wǎng)膜的治療提供理論依據(jù)和新的診治途徑。方法:(1)把健康成年雄性SD大鼠55只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,體重范圍在200-300g,購自南昌大學(xué)動(dòng)物科學(xué)研究所,數(shù)字表法隨機(jī)分成空白對(duì)照組簡稱假手術(shù)組、缺血再灌注組簡稱模型組、缺血再灌注模型+枸杞多糖組簡稱LBP藥物組,假手術(shù)組5只,其他兩組每組25只,每組分總共5個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6h、12h、24h、48h、72h、),各時(shí)間點(diǎn)5只,在室溫,給予充足食物與水,12h光照,12h黑夜下適應(yīng)性生活7天。(2)LBP藥物組SD雄性大鼠給與4ml/100g的枸杞多糖溶液灌胃處理(每天一次,連續(xù)一周),模型組SD雄性大鼠和假手術(shù)組給與4ml/100g的0.9%氯化鈉溶液處理(每天一次,連續(xù)一周)。(3)采取動(dòng)脈夾夾閉大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈的方式制作視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型。用動(dòng)脈夾夾閉模型組、LBP藥物組右側(cè)頸總動(dòng)脈(夾閉1小時(shí)),假手術(shù)組只進(jìn)行手術(shù)操作暴露右頸總動(dòng)脈不夾閉1小時(shí)。1小時(shí)后逐層縫合切口。(4)分別在缺血再灌注后6h、12h、24h、48h、72h后處理各組SD大鼠,在腹腔注射10%水合氯醛溶液行深度麻醉下處死SD大鼠,制作眼球標(biāo)本行HE染色,在顯微鏡下觀察視網(wǎng)膜各層形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測各組大鼠視網(wǎng)膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表達(dá)。結(jié)果:(1)HE染色結(jié)果:視網(wǎng)膜缺血再灌注后6小時(shí),輕度視網(wǎng)膜水腫,視網(wǎng)膜厚度略有增加,神經(jīng)纖維層和內(nèi)叢狀層水腫淡染,視網(wǎng)膜缺血再灌注后12,24小時(shí),視網(wǎng)膜嚴(yán)重水腫,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)減少,內(nèi)核層較薄,細(xì)胞排列松散無序;48小時(shí)水腫消失,主要表現(xiàn)為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)繼續(xù)減少,內(nèi)核層進(jìn)一步變薄,可見空泡化;72小時(shí)視網(wǎng)膜變薄,視網(wǎng)膜細(xì)胞數(shù)量減少。與模型組(RIRI組)相比,藥物組(LBP組)在6h和12h,24h時(shí)視網(wǎng)膜組織水腫緩解;24h,48h和72h較模型組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞減少較少,視網(wǎng)膜厚度無明顯變化。藥物組的視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)基本上是排列有序的。(2)免疫組化結(jié)果:假手術(shù)組視網(wǎng)膜活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)為(103.12±12.97個(gè))mm~(-2),模型組視網(wǎng)膜活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)在灌注后6h開始表達(dá)增多,陽性細(xì)胞數(shù)為(559.03?38.25)個(gè)·mm~(-2),24 h達(dá)到較高水平,陽性細(xì)胞數(shù)為(1528.12?52.74)個(gè)mm~(-2),隨后逐漸下降,LBP藥物組視網(wǎng)膜各時(shí)間點(diǎn)活性Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)均顯著少于缺血再灌注組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。假手術(shù)組視網(wǎng)膜可見大量Bcl-2陽性細(xì)胞,Bcl-2陽性細(xì)胞在缺血再灌注組RIRI后6h開始下降,12h后持續(xù)下降,24h下降至較低水平。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn),藥物組中Bcl-2陽性細(xì)胞的數(shù)量顯著高于缺血再灌注視網(wǎng)膜,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)。Bax陽性細(xì)胞在假手術(shù)組大鼠表達(dá)較少;在缺血再灌注組中,在RIRI后6小時(shí)在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層中觀察到Bax陽性細(xì)胞,并且在24小時(shí)達(dá)到更高水平,并且在48小時(shí)開始減少。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn),藥物組中的Bax陽性細(xì)胞顯著少于缺血再灌注組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.05)結(jié)論:(1)枸杞多糖對(duì)視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷引起的視網(wǎng)膜損傷有保護(hù)作用。(2)其保護(hù)是抑制視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中的細(xì)胞凋亡,其機(jī)制是通過上調(diào)Bcl-2、下調(diào)Bax與Caspase-3表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R774.1
【圖文】：

（RIRI組24hHE染色×400)

8 假手術(shù)組大鼠視網(wǎng)膜活性 Caspase-3 陽性細(xì)胞表達(dá)×2及 LBP 治療組 Caspase-3 蛋白表達(dá)，缺血再灌注組視網(wǎng)膜活性 Caspase-3 陽性細(xì)胞數(shù)高水平，然后逐漸下降。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，藥物組細(xì)胞數(shù)明顯少于缺血再灌注組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義表 1)。組 Caspase-3 蛋白表達(dá)×200 圖 10LBP 治療組 Caspase-

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王雪維;李燕;;Bcl-2、Bax在青光眼神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡中的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2015年22期

2 王t

本文編號(hào)：2733575